典型文献
人羊膜间充质干细胞原代培养及向心肌样细胞分化
文献摘要：
目的 探讨原代人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)体外分离培养的方法及向心肌样细胞分化的能力.方法 收集人正常足月顺产或剖宫产后胎盘羊膜,采用机械-酶消化法分离培养hAMSCs,观察其形态学特点.取第3代hAMSCs,通过诱导成骨、成脂分化和流式细胞术检测鉴定其干细胞特性,体内接种法和体外软琼脂克隆法检测其致瘤性.应用5-aza、TGF-β1及Ang-Ⅱ诱导其向心肌样细胞分化(实验组),镜下观察细胞形态学变化;qRT-PCR、West-ern blot及细胞免疫荧光法分别检测心肌细胞标志基因cTnI、ACTN2、NKX2.5及其蛋白的表达;CCK-8实验检测细胞活性;淋巴细胞增殖实验检测细胞免疫原性.结果 分离纯化后的hAMSCs呈梭形,漩涡状生长,可成功诱导向成骨、成脂分化;流式细胞术结果显示hAMSCs高表达CD44、CD90,低表达CD45,不表达HLA-DR;体内外实验未显示致瘤性.诱导hAMSCs向心肌样细胞分化后,细胞呈棒状或长梭形,胞间见细丝样连接结构,与对照组相比,实验组中cTnI、ACTN2、NKX2.5基因及其蛋白水平明显升高,且保持良好的细胞活性及低免疫原性,差异有统计学意义(P<0.05).结论 hAMSCs可在体外分离培养且能够被诱导向心肌样细胞分化,为心肌疾病的再生修复治疗提供了新的种子细胞.
文献关键词：
羊膜间充质干细胞;原代培养;诱导分化;心肌样细胞
中图分类号：
作者姓名：
杨曲;张卫芳;陈祺;胡锋;李娟;罗军
作者机构：
南昌大学第二附属医院康复医学科,南昌 330000;南昌大学第二附属医院药学部,南昌 330000;南昌大学第二附属医院心血管内科,南昌 330000
文献出处：
引用格式：
[1]杨曲;张卫芳;陈祺;胡锋;李娟;罗军-.人羊膜间充质干细胞原代培养及向心肌样细胞分化)[J].临床与实验病理学杂志,2022(05):513-519
A类：
ACTN2
B类：
人羊膜间充质干细胞,原代培养,向心,心肌样细胞,细胞分化,human,amniotic,mesenchymal,stem,cells,hAMSCs,外分,分离培养,足月顺产,剖宫产,胎盘,盘羊,酶消化法,成骨,成脂分化,流式细胞术,检测鉴定,干细胞特性,内接,软琼脂克隆,致瘤性,aza,TGF,Ang,细胞形态学,qRT,West,ern,blot,细胞免疫,免疫荧光法,心肌细胞,标志基因,cTnI,NKX2,CCK,实验检测,细胞活性,淋巴细胞增殖,免疫原性,分离纯化,漩涡,CD44,CD90,低表达,CD45,HLA,DR,体内外,棒状,细丝,连接结构,保持良好,心肌疾病,再生修复,修复治疗,种子细胞,诱导分化
AB值：
0.352858
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