目的 探究糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)诱导的小鼠肾损伤过程中的变化及作用.方法 使用微血管夹夹闭小鼠左侧肾蒂45 min诱导小鼠缺血再灌注肾损伤模型,分别于第5、15、30和80天收集小鼠血液,通过试剂盒检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,Scr)的浓度.采用过碘酸希夫染色法(periodic acid-Schiff staining,PAS)和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察肾组织炎性细胞浸润情况;通过免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测肾损伤分子-1(kidney injury molecular-1,Kim-1)、炎症细胞标志物F4/80和CD3的表达变化;通过实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、IF和蛋白质印迹技术(Western blotting,WB)检测GR的表达.选取8周龄雌性小鼠肾脏单侧IR后进行腹腔注射米非司酮(mifepristone,MF,50 mg·kg-1·d-1),检测实验组和对照组的BUN和Scr浓度,IF检测Kim-1和F4/80的蛋白水平.结果 与未处理组相比,小鼠缺血再灌注肾损伤后,第5天小鼠血清BUN升高4.9倍,Scr升高8.3倍;RT-qPCR结果显示,IR组小鼠炎症分子的mRNA较未处理空白组升高3～5倍,GR的mRNA较空白组下降3.5倍.IF和WB结果显示,GR的蛋白质水平显著下调;IR处理的同时,注射MF阻断GR后,BUN和Scr较注射玉米油的对照组均增高,表明阻断GR会导致IR后肾功能损伤加重,IF结果显示Kim-1和F4/80表达明显升高,说明炎性反应增强,肾损伤加重.结论 GR的表达和IR诱导肾损伤存在显著的相关性,同时阻断GR会进一步加重IR诱导的肾损伤.

肾损伤;糖皮质激素受体;缺血再灌注;炎症反应;米非司酮

王向东;姜敏;王鑫;巩永凤

滨州医学院生理学教研室,山东烟台264000;滨州医学院药理学教研室,山东烟台264000;青岛大学病理生理学教研室,山东青岛266000

首都医科大学学报

[1]王向东;姜敏;王鑫;巩永凤-.糖皮质激素受体在缺血再灌注肾损伤中的作用)[J].首都医科大学学报,2022(02):260-268

糖皮质激素受体,缺血再灌注肾损伤,glucocorticoid,receptor,GR,ischemia,reperfusion,微血管,管夹,夹闭,肾损伤模型,试剂盒,血尿素氮,blood,urea,nitrogen,BUN,血肌酐,serum,creatinine,Scr,碘酸,染色法,periodic,acid,Schiff,staining,PAS,苏木,木精,伊红,hematoxylin,eosin,HE,肾组织,炎性细胞浸润,免疫荧光,immunofluorescence,IF,肾损伤分子,kidney,injury,molecular,Kim,炎症细胞,F4,CD3,表达变化,real,quantitative,qPCR,蛋白质印迹技术,blotting,WB,周龄,雌性小鼠,腹腔注射,米非司酮,mifepristone,MF,未处理,小鼠血清,炎症分子,蛋白质水平,玉米油,肾功能损伤,炎性反应

0.346152