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典型文献
改良法原代培养人脂肪间充质干细胞及其鉴定
文献摘要:
背景:采用常规酶消化法提取人脂肪间充质干细胞,由于消化的时间过长,导致获得的细胞活性变差,为满足组织工程对种子细胞数量的需求,该实验旨在寻找一种改良的人脂肪间充质干细胞培养方法.目的:胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取人脂肪间充质干细胞并进行相关生物学特性的鉴定.方法:将脂肪组织剪碎后分别应用胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法、常规胶原酶消化法进行培养;通过锥虫蓝拒染法计数细胞,比较不同方法获取细胞的产量、活力及增殖能力;利用流式细胞仪检测改良组细胞表面抗原CD105、CD73与CD44的表达;成骨或成脂诱导后,用碱性磷酸酶染色和油红O染色鉴定细胞分化能力.结果 与结论:①胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取的细胞数量远多于常规酶消化法;②胶原酶Ⅰ消化联合组织块培养法获取的人脂肪间充质干细胞增殖能力强,细胞活力好,比常规酶消化法早1 d进入平台期,传代一次需5 d左右;③第3代改良组人脂肪间充质干细胞CD105、CD73与CD44表达均呈阳性,且纯度均达93%以上;④改良法获取的人脂肪间充质干细胞有良好的成骨与成脂分化能力;⑤结果表明,胶原酶Ⅰ消化法联合组织块培养法较常规酶消化法可获得数量多、活力好、增殖能力强的人脂肪间充质干细胞,且能够稳定传代,具有良好的分化能力,这满足了组织工程学的需求.
文献关键词:
人脂肪间充质干细胞;原代培养;胶原酶Ⅰ消化法;组织块培养法;改良;产量;增殖;活力;分化
作者姓名:
王慧;王翠菊;郑钧元;王华;郭宝娟;陈培;杨旭芳
作者机构:
牡丹江医学院,病理生理学教研室,黑龙江省牡丹江市 157000;牡丹江医学院,形态学实验室,黑龙江省牡丹江市 157000;牡丹江心血管病医院放射诊疗中心,黑龙江省牡丹江市 157000
引用格式:
[1]王慧;王翠菊;郑钧元;王华;郭宝娟;陈培;杨旭芳-.改良法原代培养人脂肪间充质干细胞及其鉴定)[J].中国组织工程研究,2022(31):5002-5007
A类:
B类:
改良法,原代培养,人脂肪间充质干细胞,细胞活性,种子细胞,细胞数量,干细胞培养,培养方法,组织块培养法,生物学特性,脂肪组织,胶原酶消化法,锥虫,不同方法,流式细胞仪,细胞表面,表面抗原,CD105,CD73,CD44,成骨,碱性磷酸酶,细胞分化,分化能力,干细胞增殖,细胞增殖能力,细胞活力,平台期,传代,组人,成脂分化,得数,组织工程学
AB值:
0.182852
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