背景:汉黄芩苷已被证明有抗炎、神经保护等多种药理活性作用,但其半衰期短、难溶于水,有机溶剂溶解后不良反应大.研究发现,聚己内酯-聚乙二醇能够结合高度疏水的药物,解决药物难溶问题且可以达到缓释的效果,但无法精确靶向到达损伤部位,制成胶束后因其尺寸小,可以穿透细胞膜.目的:制备汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束以及脂肪干细胞携载汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束,以解决汉黄芩苷难溶性和半衰期短的问题,并使药物能靶向到达损伤部位.方法:透析法制备汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束,对其进行表征,检测包封率和载药量及体外释药速率.采用胶原酶消化法制备SD大鼠脂肪干细胞,流式细胞术、免疫组化、免疫荧光检测CD90、CD44、CD45的表达,成脂诱导14 d后进行油红O染色.CCK-8法检测汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束对脂肪干细胞的毒性.香豆素6和汉黄芩苷胶束与脂肪干细胞共孵育进行细胞定位.结果 与结论:①汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束平均粒径为(26.7±0.4)nm,Zeta电势为(-33.2±0.3)mV,外观为比较均一的圆球型;②汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束包封率为(90.2±2.04)％,载药量为(9.18±0.31)％;③游离汉黄芩苷24 h累计释放率为98％,汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束96 h累计释放率为87％;④流式细胞术、免疫组化、免疫荧光结果显示,脂肪干细胞表面标志CD90、CD44高表达,CD45几乎不表达,成脂诱导后油红O染色显示脂滴呈红色;⑤CCK-8结果显示,胶束质量浓度在10-200 mg/L时,对脂肪干细胞无毒性;⑥激光共聚焦显微镜观察可见,香豆素6和汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束能进入脂肪干细胞线粒体;⑦结果表明,汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束可进入脂肪干细胞内,脂肪干细胞可携载汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束.

汉黄芩苷;聚己内酯;聚乙二醇;胶束;表征;体外释放;脂肪干细胞

王笑;刘卿;胡瑶蕊;谷成旭;郭绮萱;朱永林;张璐萍

滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室,山东省烟台市 264000;滨州医学院烟台附属医院骨科,山东省烟台市 264000

中国组织工程研究

[1]王笑;刘卿;胡瑶蕊;谷成旭;郭绮萱;朱永林;张璐萍-.脂肪干细胞携载汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束的制备)[J].中国组织工程研究,2022(31):4996-5001

脂肪干细胞,汉黄芩苷,聚己内酯,聚乙二醇,胶束,神经保护,药理活性,半衰期,溶于,有机溶剂,疏水,损伤部位,成胶,细胞膜,难溶性,透析法,包封率,载药量,体外释药,胶原酶消化法,流式细胞术,免疫组化,免疫荧光检测,CD90,CD44,CD45,成脂,CCK,香豆素,孵育,细胞定位,平均粒径,Zeta,电势,mV,均一,圆球型,释放率,细胞表面,表面标志,脂滴,无毒性,激光共聚焦显微镜,体外释放

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