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兔耳郭软骨细胞的分离培养与鉴定
文献摘要：
背景:基于3D打印支架材料的耳郭畸形再造是近年来的研究热点,而软骨细胞在支架上能否正常生长是其关键问题.目的:通过探讨兔耳郭软骨细胞的原代培养方法,为软骨细胞与组织工程学结合的应用奠定坚实基础.方法:采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法获取兔耳郭软骨细胞,体外培养并传代.通过不同传代细胞的形态学观察、生长曲线绘制、番红O-固绿染色、甲苯胺蓝染色、维多利亚蓝染色及糖胺多糖表达水平测定,对软骨细胞进行鉴定.结果 与结论:①倒置相差显微镜观察耳郭软骨细胞正常形态为梭形及多角形,传代培养6代以后成明显长梭形,且增殖速度明显减缓甚至停滞;②生长曲线绘制显示软骨细胞第2-5代均能稳定成直线增殖趋势;③番红O-固绿染色显示兔耳郭软骨细胞的细胞核结构和细胞质结构清晰,具有良好的形态学特征;④甲苯胺蓝染色提示软骨基质在培养初期分泌较少,随着细胞融合的增多而逐渐增加;⑤维多利亚蓝染色显示软骨细胞有胶原纤维生成,提示其具有正常功能;⑥糖胺多糖表达水平测定显示软骨细胞有特异性糖胺多糖的分泌;⑦实验成功建立了兔耳郭软骨细胞原代培养的分离和鉴定体系,获得了具有生物活性、可以进一步运用于组织工程学研究的耳郭软骨细胞.
文献关键词：
耳郭再造;软骨细胞;原代培养;细胞鉴定;序贯消化法
中图分类号：
作者姓名：
钟自玲;瞿申红;韩星;吴迪
作者机构：
广西中医药大学研究生院,广西壮族自治区南宁市 530200;广西壮族自治区人民医院耳鼻咽喉头颈外科,广西壮族自治区南宁市 530016
文献出处：
引用格式：
[1]钟自玲;瞿申红;韩星;吴迪-.兔耳郭软骨细胞的分离培养与鉴定)[J].中国组织工程研究,2022(23):3633-3637
A类：
序贯消化法
B类：
兔耳,软骨细胞,分离培养,印支,支架材料,耳郭畸形,架上,原代培养,培养方法,组织工程学,胰蛋白酶,胶原酶,体外培养,形态学观察,生长曲线,番红,固绿,甲苯胺蓝染色,维多利亚,倒置,相差显微镜,多角形,传代培养,停滞,细胞核,细胞质,形态学特征,软骨基质,细胞融合,胶原纤维,耳郭再造,细胞鉴定
AB值：
0.203454
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