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微小RNA-27b-3p与基质金属蛋白酶13在人软骨细胞的对应关系
文献摘要：
目的:探讨微小RNA-27b-3p(miR-27b-3p)与基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在人软骨细胞表达及其靶向对应关系。方法:运用蛋白质印迹法(WB)与实时定量PCR技术(qRT-PCR)明确miR-27b-3p与MMP13在正常和骨关节炎(OA)人软骨细胞的表达。利用不同浓度的白介素(IL)1β干预原代人软骨细胞24 h，或利用不同时间点的IL-1β(10 ng/ml)干预原代人软骨细胞。利用原位杂交、转染及双荧光素酶报告技术确定miR-27b-3p与MMP13的靶向对应关系；结合运用核转录因子-κB(NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂评估其作用机制。两组资料比较采用独立样本t检验，多组资料比较采用单因素方差分析，LSD法多重比较检验。结果:WB、qRT-PCR和原位杂交检测结果显示，与正常软骨相比，OA软骨中miR-27b-3p表达降低(t＝5.07，P<0.01)，MMP13表达升高(t＝－6.31，P<0.01)。IL-1β干扰后的结果显示miR-27b-3p表达降低(F＝129.54，P<0.05)，MMP-13表达升高(F＝394.50，P<0.05)。通过TargetScan数据库和荧光素酶报告基因检测结果分析，野生型-MMP13组荧光素酶活性降低(F＝55.27，P<0.001)，突变型-MMP-13荧光素酶活性变化没有统计学意义(P＝0.654)。利用特异性MAPK信号抑制剂和NF-kB抑制剂干预IL-1β诱导软骨细胞模型结果提示，与对照组相比，抑制剂组的MMP13表达水平降低(F＝28.43，P<0.001)，miR-27b-3p表达水平增高(F＝35.04，P<0.001)。结论:miR-27b-3p在OA软骨细胞呈现低表达，并负向调控MMP13的表达，其作用机制可能是通过NF-κB和MAPK信号通路，这结果提示这miR-27b-3p可能作为OA诊断与治疗的潜在靶点。
文献关键词：
骨关节炎;微RNAs;基质金属蛋白酶类;NF-κB;丝裂原激活蛋白激酶类
中图分类号：
作者姓名：
李兴;李震;肖方骏;翁家贤;潘建科;何沛恒;苏海涛
作者机构：
510000 广州中医药大学第二附属医院骨伤科;510000 广州中医药大学;510000 广州，中山大学附属第一医院关节外科
文献出处：
引用格式：
[1]李兴;李震;肖方骏;翁家贤;潘建科;何沛恒;苏海涛-.微小RNA-27b-3p与基质金属蛋白酶13在人软骨细胞的对应关系)[J].中华关节外科杂志（电子版）,2022(04):431-440
A类：
丝裂原激活蛋白激酶类
B类：
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AB值：
0.201652
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