典型文献
基于CRISPR/Cas9技术编辑RAB39B基因对骨髓间充质干细胞软骨分化的影响
文献摘要：
背景:基于前期研究,课题组通过蛋白组学和高通量测序筛选出RAB39B基因与骨髓间充质干细胞的增殖、软骨分化可能存在相关性.目的:探讨利用CRISPR/Cas9技术编辑敲除RAB39B基因对骨髓间充质干细胞软骨分化的影响.方法:利用CRISPR/Cas9慢病毒感染方法,构建敲低RAB39B基因稳转细胞系,将兔骨髓间充质干细胞分为正常对照组、空载对照组、RAB39B基因敲除组,通过Western blot鉴定CRISPR/Cas9系统对RAB39B的敲除效果,CCK-8法检测骨髓间充质干细胞增殖活性,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞凋亡率,qRT-PCR检测骨髓间充质干细胞成软骨分化COLⅡ、COLⅩ基因mRNA表达,Western blot检测骨髓间充质干细胞成软骨分化相关通路RHOA、LIMK、Sox9蛋白表达.结果 与结论:①敲除RAB39B基因质粒的慢病毒感染兔骨髓间充质干细胞48-96 h后荧光显著表达;Western blot检测验证RAB39B基因敲除后骨髓间充质干细胞中RAB39B蛋白表达显著降低(P<0.01);②与正常对照组、空载对照组比较,RAB39B基因敲除组细胞增殖活性显著降低(P<0.01);细胞凋亡率增加(P<0.01);COLⅡ、COLⅩmRNA表达显著降低(P<0.01);RHOA、LIMK、Sox9蛋白表达显著降低(P<0.01);③结果 表明,CRISPR/Cas9系统编辑敲低RAB39B基因后能够抑制骨髓间充质干细胞增殖,同时促进细胞凋亡,降低其软骨细胞分化能力,说明RAB39B基因可能对骨髓间充质干细胞增殖、软骨分化能力产生影响,其具体作用机制有待进一步研究.
文献关键词：
基因编辑;RAB39B基因;骨髓间充质干细胞;软骨细胞;软骨分化
中图分类号：
作者姓名：
马笃军;彭力平;周紫琼;赵静;朱厚均;蒋顺琬;钟静;佘锐豪
作者机构：
广州中医药大学第四临床医学院,广东省深圳市 518033;广州中医药大学,广东省广州市 510006
文献出处：
引用格式：
[1]马笃军;彭力平;周紫琼;赵静;朱厚均;蒋顺琬;钟静;佘锐豪-.基于CRISPR/Cas9技术编辑RAB39B基因对骨髓间充质干细胞软骨分化的影响)[J].中国组织工程研究,2022(19):2978-2984
A类：
RAB39B,LIMK
B类：
CRISPR,Cas9,技术编辑,骨髓间充质干细胞,前期研究,蛋白组学,细胞的增殖,慢病毒感染,敲低,细胞系,兔骨,正常对照,空载,基因敲除,blot,CCK,干细胞增殖,细胞增殖活性,流式细胞仪,细胞凋亡率,qRT,成软骨分化,COL,相关通路,RHOA,Sox9,质粒,测验,统编,软骨细胞分化,分化能力,具体作用,基因编辑
AB值：
0.152525
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