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异紫堇碱衍生物COM33对Huh7细胞增殖和凋亡的影响
文献摘要：
目的:观察异紫堇碱衍生物COM33对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的影响。方法:以0.625、1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L COM33分别处理正常肝细胞LO2和肝癌细胞Huh7 24 h后，采用细胞计数法(CCK-8)检测细胞吸光度(
A)值，并在Graphpad prism软件中通过非线性回归分析获得半数抑制浓度(IC
50)。随后采用COM33处理Huh7细胞，以无COM33组设为对照组；细胞克隆实验用于评估COM33对Huh7细胞增殖的影响；10 μmol/L COM33处理Huh7细胞24 h后，在倒置显微镜下观察细胞形态变化，用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染试剂盒检测细胞凋亡情况，免疫印迹实验检测给药前后细胞中Gasdermin D(GSDMD)蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9剪切体(cleaved Caspase-9)的表达水平。组间比较采用Student’s
t检验。
结果:COM33剂量依赖性地抑制Huh7细胞增殖，且在Huh7细胞中的IC
50值明显低于LO2细胞[(11.99±0.53) μmol/L比(33.33±3.10) μmol/L，
t＝11.810，
P<0.01]；给药组细胞形成的克隆集落少于对照组[(681±13)个比(387±29)个，
t＝15.950，
P<0.01]；Huh7细胞经COM33处理后出现皱缩变圆、贴壁不良；给药组Annexin V阳性细胞比例高于对照组[(7.28±0.86)%比(1.37±0.09)%，
t＝11.820，
P<0.01]；两组细胞GSDMD蛋白表达并无差异，且未检测到GSDMD剪切体；bax蛋白相对表达量给药组高于对照组(1.02±0.04比0.50±0.06，
t＝12.250，
P<0.01)；cleaved Caspase-9蛋白相对表达量给药组高于对照组(0.39±0.11比0.07±0.03，
t＝4.726，
P<0.01；0.39±0.11比0.16±0.07，
t＝2.942，
P<0.05)；bcl-2蛋白相对表达量给药组低于对照组(0.54±0.06比0.82±0.12，
t＝3.551，
P<0.05)。
结论:COM33对LO2细胞毒性不明显，可有效抑制Huh7细胞增殖，并诱导其凋亡。
文献关键词：
肝细胞癌;异紫堇碱衍生物;凋亡
中图分类号：
作者姓名：
夏雨;麦家洛;胡晓原;姚纪友;李宁;夏薇;陆敏强
作者机构：
华南理工大学附属第二医院肝胆外科二科，广州 510180;广州市第一人民医院生殖医学中心 510180
文献出处：
引用格式：
[1]夏雨;麦家洛;胡晓原;姚纪友;李宁;夏薇;陆敏强-.异紫堇碱衍生物COM33对Huh7细胞增殖和凋亡的影响)[J].中华实验外科杂志,2022(07):1278-1280
A类：
异紫堇碱,异紫堇碱衍生物,COM33
B类：
Huh7,增殖和凋亡,别处,理正,LO2,肝癌细胞,计数法,CCK,吸光度,Graphpad,prism,非线性回归分析,半数抑制浓度,IC
,细胞克隆,倒置,显微镜下,细胞形态,形态变化,膜联蛋白,异硫氰酸荧光素,Annexin,FITC,碘化,试剂盒,免疫印迹实验,实验检测,Gasdermin,GSDMD,细胞淋巴瘤,白血病,bcl,bax,天冬氨酸,Caspase,剪切体,cleaved,Student,剂量依赖,量依赖性,药组,集落,皱缩,变圆,贴壁,阳性细胞,未检,白相,相对表达量,细胞毒性,肝细胞癌
AB值：
0.266083
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