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生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒工艺的建立
文献摘要：
目的 优化生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒的条件,并放大培养规模,建立MDCK细胞和4种型别流感病毒的培养工艺.方法 分别在不同溶氧(DO)、pH、转速、接种密度条件下培养MDCK细胞,每24 h取样计数,优化细胞培养条件后,放大至50 L生物反应器,并接种4种型别流感病毒(H1N1:A/California/7/2009、H3N2:A/Texas/20/2012、BV:B/Brisbane/60/2008、BY:B/Phuket/3073/2013),接毒条件为 MOI =10-4,胰酶终浓度为15 μg/mL,细胞密度为(1.8～2.2)× 106个/mL,病毒维持液为DMEM,培养温度为甲型34.5℃、乙型33.5℃,检测病毒血凝效价、病毒滴度(CCID50)和血凝素(hemagglutinin,HA)含量.结果 在5 L及50 L生物反应器中培养MDCK细胞,活细胞密度均可在72 h后达到8.0 × 106个/mL,活率在95％以上;H1N1、H3N2、BV、BY 的血凝效价分别为 7、11、9、9 log2(HAU/25 μL),CCID50均达 6.5 以上,HA 含量分别为 20、40、35、40 μg/mL.结论 成功建立了 MDCK细胞和流感病毒的无血清全悬浮培养工艺,为细胞基质流感疫苗的研发奠定了基础.
文献关键词：
流感病毒;MDCK细胞;无血清培养;全悬浮培养
中图分类号：
作者姓名：
李乐凯;吴业红;徐军;迟祥;李爽;席莉;张雪梅;郭占龙
作者机构：
长春生物制品研究所有限责任公司,吉林长春130012
文献出处：
引用格式：
[1]李乐凯;吴业红;徐军;迟祥;李爽;席莉;张雪梅;郭占龙-.生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒工艺的建立)[J].中国生物制品学杂志,2022(09):1082-1089
A类：
CCID50
B类：
生物反应器,无血清培养,MDCK,流感病毒,型别,溶氧,DO,接种密度,细胞培养,培养条件,H1N1,California,H3N2,Texas,BV,Brisbane,BY,Phuket,MOI,胰酶,细胞密度,DMEM,培养温度,甲型,乙型,毒血,效价,病毒滴度,血凝素,hemagglutinin,活细胞,log2,HAU,全悬浮培养,基质流,流感疫苗
AB值：
0.350078
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