典型文献
基于TLDA技术的甲型流感病毒高通量快速分型方法的建立及应用
文献摘要：
目的:开发用于甲型流感病毒快速分型的Taqman低密度芯片(Taqman low density array，TLDA)，可以同时开展甲型流感病毒通用、H1-H16及N1-N9亚型高通量快速鉴定，适用于流感样病例及禽流感标本中甲型流感病毒的快速分型鉴定。方法:设计甲型流感病毒通用、H1-16亚型、N1-9亚型的引物探针，并将其预先定制在TLDA反应芯片上；优化TLDA退火温度；用多种亚型的甲型流感病毒核酸进行10倍梯度稀释，结合微滴式数字PCR定量方法评价TLDA检测灵敏度；用乙型流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞等其他多种常见的呼吸道病毒验证该TLDA检测特异性，同时选用多种已经明确分型的甲型流感病毒评价该TLDA的特异性和有效性；采集16例流感样病例标本及24例禽流感外环境标本用该芯片开展检测。结果:该TLDA的最佳退火温度为60 ℃；针对甲型流感病毒H1N1、H3N2、H5N6、H7N9和H9N2，其检测灵敏度为1.52~8.00拷贝/μl；能特异性检测甲型流感病毒，与其他常见呼吸道病毒无交叉反应，并能精准鉴定多种甲型流感病毒的亚型；应用该方法检测16例流感样病例标本和24例禽流感外环境监测标本，均可分型。结论:基于TLDA技术建立的甲型流感病毒高通量快速分型检测方法具有较好的灵敏度和特异性，适用于流感样病例和禽流感标本的病原快速检测，特别是对目前用常规商业化试剂尚无法鉴定的新型甲型流感病毒能够进行快速的亚型筛查与鉴定。
文献关键词：
Taqman低密度芯片;甲型流感病毒;高通量检测
中图分类号：
作者姓名：
楼秀玉;赵翔;王欣莹;陈寅;孙逸;李榛;余昭;茅海燕
作者机构：
浙江省疾病预防控制中心微生物检验所，杭州 310051;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，北京 102206
文献出处：
引用格式：
[1]楼秀玉;赵翔;王欣莹;陈寅;孙逸;李榛;余昭;茅海燕-.基于TLDA技术的甲型流感病毒高通量快速分型方法的建立及应用)[J].中华实验和临床病毒学杂志,2022(03):311-316
A类：
TLDA
B类：
甲型流感病毒,分型方法,建立及应用,Taqman,low,density,array,H16,快速鉴定,流感样病例,禽流感,分型鉴定,引物,物探,退火温度,病毒核酸,梯度稀释,定量方法,方法评价,检测灵敏度,乙型流感病毒,腺病毒,合胞,呼吸道病毒,外环境,H1N1,H3N2,H5N6,H7N9,H9N2,拷贝,特异性检测,交叉反应,精准鉴定,环境监测,分型检测,快速检测,高通量检测
AB值：
0.206504
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