目的 探讨活性氧和铁死亡在丙酮醛诱导小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)损伤中是否存在相互作用.方法 应用丙酮醛损伤MC3T3-E1细胞建立模拟糖尿病骨质损伤的细胞模型.应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定MC3T3-E1细胞的存活率;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位;双氯荧光素(DCFH-DA)荧光显微镜照相法检测胞内活性氧水平;碱性磷酸酶试剂盒检测定碱性磷酸酶活性;茜素红染色观察成骨细胞晚期标志物-矿化结节的形成;铁离子试剂盒检测铁离子水平;Western blot检测成骨细胞的抑制铁死亡的标志蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平.结果 0.6 mmol/L丙酮醛处理MC3T3-E1细胞24 h可明显减少GPX4的表达(P<0.001),同时可使胞内铁离子浓度升高,细胞存活率降低,线粒体膜电位丢失,胞内活性氧水平升高,碱性磷酸酶活性降低和矿化结节减少(P<0.001).应用2 mmol/L活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸和丙酮醛共处理MC3T3-E1细胞24 h可增加GPX4的表达(P<0.01),应用4μmol/L铁死亡抑制剂铁抑素-1与丙酮醛共处理成骨细胞24 h可使胞内活性氧水平降低(P<0.001);应用N-乙酰半胱氨酸或铁抑素-1与丙酮醛共处理成骨细胞24 h均能对抗丙酮醛引起的上述其他细胞损伤(P<0.001).结论 活性氧与铁死亡通路相互作用在丙酮醛引起MC3T3-E1成骨细胞损伤中起重要的作用.

活性氧;铁死亡;丙酮醛;成骨细胞;糖尿病合并骨质疏松症

冯苑仪;羊冬梅;智喜梅;邓海鸥;张伟杰;王瑞雪;吴文

南方医科大学第二临床医学院,广东 广州 510515;广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省老年医学研究所东病区内分泌科,广东 广州 510080

南方医科大学学报

[1]冯苑仪;羊冬梅;智喜梅;邓海鸥;张伟杰;王瑞雪;吴文-.活性氧与铁死亡通路相互作用在丙酮醛引起的小鼠胚胎成骨细胞损伤中起重要作用)[J].南方医科大学学报,2022(01):108-115

铁死亡,丙酮醛,小鼠胚胎,成骨细胞,细胞损伤,MC3T3,E1,立模,骨质损伤,细胞模型,试剂盒,CCK,罗丹明,荧光显微镜,照相法,定线,线粒体膜电位,荧光素,DCFH,DA,活性氧水平,碱性磷酸酶活性,茜素红,矿化结节,离子水,blot,制铁,谷胱甘肽过氧化物酶,GPX4,铁离子浓度,细胞存活率,节减,活性氧清除,清除剂,乙酰半胱氨酸,共处理,平降,糖尿病合并骨质疏松症

0.197677