昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性主要是解毒酶活性的增强和钠离子通道的敏感度降低所致.本研究采用RT-PCR和RACE技术克隆获得了牧草盲蝽Lygus pratensis P450 CYP6A13基因(GenBank登录号:MN782520)及钠离子通道LPVSSC基因cDNA全长序列(GenBank登录号:MW821485).其中CYP6A13基因全长2003 bp,开放阅读框1503 bp,编码500个氨基酸,预测蛋白分子质量为57.2 kDa,主要位于细胞内质网,等电点为5.77,无跨膜区和信号肽,存在血红素结合保守功能区.同源比对与系统进化分析表明,牧草盲蝽的CYP6A13与分类学关系上较为接近的昆虫同源蛋白间高度相似.钠离子通道序列LPVSSC开放阅读框6072 bp,编码2024个氨基酸,预测蛋白分子质量为228.94 kDa,等电点为4.99,无信号肽,有多个跨膜区域,4个同源结构域(I～IV),每个结构域有6个跨膜片段(S1～S6),存在MFM基序.基因表达谱结果表明:CYP6A13在牧草盲蝽成虫头部的表达量高于胸、腹部;室内筛选的高效氯氟氰菊酯抗性R14、R6品系的CYP6A13表达量是敏感品系的18.74和5.45倍;CYP6A13表达量在雌、雄成虫之间无显著差异;不同发育期基因表达量为:初羽化成虫>5龄若虫>4龄若虫>3龄若虫>2龄若虫>1龄若虫.测序比对高效氯氟氰菊酯抗性与敏感品系的钠离子通道序列IIS4～IIS6区域,未发现存在可能导致靶标抗性的氨基酸突变.结果表明CYP6A13基因过表达可能导致了牧草盲蝽对高效氯氟氰菊酯的抗药性,为深入解析CYP6A13基因介导抗药性的功能研究奠定基础.

牧草盲蝽;细胞色素P450;钠离子通道;表达谱;序列分析

马亿;张文兵;张宏玲;马红悦;韩海斌;庞保平;谭瑶

内蒙古农业大学草原昆虫研究中心, 呼和浩特010020;中国农业科学院草原研究所, 呼和浩特010010

环境昆虫学报

[1]马亿;张文兵;张宏玲;马红悦;韩海斌;庞保平;谭瑶-.牧草盲蝽CYP6 A13和钠离子通道LPVSSC基因的克隆及参与高效氯氟氰菊酯的抗性分析)[J].环境昆虫学报,2022(05):1252-1263

LPVSSC,CYP6A13,MN782520,MW821485,IIS4,IIS6

牧草盲蝽,钠离子通道,高效氯氟氰菊酯,抗性分析,昆虫,拟除虫菊酯类杀虫剂,解毒酶活性,RACE,Lygus,pratensis,P450,GenBank,登录号,cDNA,全长,bp,开放阅读框,分子质量,kDa,内质网,等电点,信号肽,血红素,功能区,同源比对,系统进化分析,分类学,系上,同源蛋白,结构域,IV,膜片,S1,MFM,基序,基因表达谱,成虫,室内筛选,R14,R6,品系,发育期,基因表达量,羽化,若虫,靶标抗性,氨基酸突变,基因过表达,抗药性,导抗,功能研究,细胞色素,序列分析

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