典型文献
甜菜夜蛾肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA的克隆及功能鉴定
文献摘要：
[目的]本研究旨在阐明甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫体内肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein,PGRP)在响应苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)感染过程中的功能.[方法]利用PCR方法扩增甜菜夜蛾幼虫肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA全长cDNA;采用qRT-PCR分析SePGRP-SA在甜菜夜蛾不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、预蛹和蛹)及4龄幼虫不同组织(中肠、马氏管、围食膜、脂肪体、血淋巴和表皮)中的表达.通过RNAi技术沉默SePGRP-SA基因72 h后,qRT-PCR检测SePGRP-SA沉默效率及甜菜夜蛾4龄幼虫中肠抗菌肽相关基因(Ceropin,Attacin和Defensin)和细菌载量的变化.RNAi沉默SePGRP-SA 24 h后,以苏云金芽胞杆菌菌株Bt-GS57饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫0,24,48,72,96和120 h,计算幼虫校正死亡率;饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫 Bt-GS57 后 0,24,48 和 72 h,利用 qRT-PCR 检测中肠 SePGRP-SA,Ceropin,Attacin 和 Deffensin的相对表达量.[结果]克隆获得甜菜夜蛾SePGRP-SA全长DNA(GenBank登录号:MW265930),开放阅读框长576 bp,编码191个氨基酸,其编码蛋白的预测分子量为21.59 kD.序列分析结果表明,SePGRP-SA具有典型的PGRP和Ami2保守结构域,信号肽为19个氨基酸,为分泌型蛋白;系统进化分析发现,SePGRP-SA与斜纹夜蛾Spodoptera litura的S1PGRP亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达91.1％.发育表达谱结果表明SePGRP-SA在甜菜夜蛾4和5龄幼虫、预蛹和蛹中高表达;组织表达谱结果表明,SePGRP-SA在4龄幼虫各组织中均表达,其中以血淋巴中表达量最高.与注射dsEGFP(对照)相比,注射dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫在72 h时中肠SePGRP-SA基因表达量下调了 95.26％,Cecropin,Attacin和Deffensin表达量显著下调,中肠细菌载量显著升高.注射dsEGFP和dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫饲喂Bt-GS57,72 h时幼虫校正死亡率分别为50.00％和73.33％,表明幼虫对Bt-GS57的敏感性明显增加.甜菜夜蛾4龄幼虫取食Bt-GS57后,中肠SePGRP-SA,Cecropin,Attacin和Defensin表达量在48 h均显著增加,72 h时降低.[结论]Bt侵染能够引起甜菜夜蛾SePGRP-SA基因激活抗菌肽相关基因Cecropin,Attacin和Defensin的表达.
文献关键词：
甜菜夜蛾;免疫调控;肽聚糖识别蛋白;基因克隆;RNAi
中图分类号：
作者姓名：
李亚子;赵丹;郭晓昌;吴涵;刘兆瑞;郭巍
作者机构：
河北农业大学植物保护学院,河北保定071001;中国农业科学院研究生院,北京100081
文献出处：
引用格式：
[1]李亚子;赵丹;郭晓昌;吴涵;刘兆瑞;郭巍-.甜菜夜蛾肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA的克隆及功能鉴定)[J].昆虫学报,2022(04):417-426
A类：
SePGRP,Ceropin,Attacin,Defensin,GS57,Deffensin,MW265930,Ami2,S1PGRP,dsEGFP,dsSePGRP,Cecropin
B类：
甜菜夜蛾,肽聚糖识别蛋白,SA,功能鉴定,Spodoptera,exigua,虫体,peptidoglycan,recognition,protein,苏云金芽胞杆菌,Bacillus,thuringiensis,Bt,增甜,全长,cDNA,qRT,发育阶段,预蛹,不同组织,中肠,马氏管,脂肪体,血淋巴,RNAi,抗菌肽,细菌载量,饲喂,幼虫校正死亡率,相对表达量,GenBank,登录号,开放阅读框,bp,编码蛋白,分子量,kD,序列分析,保守结构域,信号肽,分泌型蛋白,系统进化分析,斜纹夜蛾,litura,亲缘关系,氨基酸序列,序列一致性,组织表达谱,巴中,基因表达量,取食,侵染,基因激活,免疫调控,基因克隆
AB值：
0.192251
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