典型文献
miR-101-3p通过靶向EIF4G2逆转卵巢癌SKOV3/DDP细胞对顺铂耐药性及其机制研究
文献摘要:
目的:探讨microRNA-101-3p(miR-101-3p)在卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药中的作用及其机制。方法:购买miR-101-3p模拟物(miR-101-3p mimic)、miR-101-3p抑制剂(miR-101-3p-in)、及其各自的阴性对照RNA(miR-NC mimic和miR-NC inhibitor)。应用定量逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription-PCR,qRT-PCR)和western blotting检测miR-101-3p和B淋巴瘤momlv插入区1同源物(eukaryotic translation initiation factor 4 gamma 2,EIF4G2)在卵巢癌SKOV3细胞和DDP耐药SKOV3/DDP细胞中的表达水平。用miR-101-3p模拟物和miR-101-3p模拟阴性对照转染SKOV3/DDP细胞。采用CCK-8法检测miR-101-3p模拟物转染后细胞对DDP的敏感性。流式细胞仪检测转染对细胞凋亡的影响。将EIF4G2野生型和突变型荧光素酶报告质粒与miRNA-101-3p模拟物或miRNA-101-3p NC共转染,用双荧光素酶报告系统分析荧光素酶活性。结果:CCK-8法检测结果显示,miR-101-3p在SKOV3/DDP细胞中的表达水平显著低于SKOV3细胞,EIF4G2在SKOV3/DDP细胞中的表达水平显著高于SKOV3细胞。过表达miR-101-3p能够显著提高miR-101-3p mimic组中SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其IC50值为8 μmol/L和64 μmol/L,miR-101-3p mimic可抑制SKOV3/DDP细胞活性;AO/EB实验验证过表达miR-101-3p后miR-101-3p mimic能够明显诱导SKOV3/DDP细胞凋亡。Western blotting检测结果表明,miR-101-3p mimic可显著增加B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(associated X protein,Bax)及裂解型半胱天冬酶-3的表达水平(
t=3.57、3.95、4.17,
P值均<0.05)。与miR-NC mimic相比,过表达miR-101-3p后能够明显降低EIF4G2的表达(
t=4.15,
P<0.05);荧光素酶活性检测数据显示,miR-101-3p的过表达会抑制野生型EIF4G2的荧光素酶活性,但不抑制突变型EIF4G2 3’UTR的荧光素酶活性。
结论:EIF4G2是miR-101-3p的直接作用靶点,MiR-101-3p可能通过靶向调控EIF4G2,调节卵巢癌对DDP的耐药性。
文献关键词:
miR-101-3p;EIF4G2;卵巢癌;顺铂;细胞耐药;凋亡
中图分类号:
作者姓名:
于歌;冯晓玲;牛明
作者机构:
黑龙江中医药大学药学院,哈尔滨 150006;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科,哈尔滨 150081;黑龙江中医药大学附属第一医院妇科,哈尔滨 150040;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院乳腺外科,哈尔滨150081
文献出处:
引用格式:
[1]于歌;冯晓玲;牛明-.miR-101-3p通过靶向EIF4G2逆转卵巢癌SKOV3/DDP细胞对顺铂耐药性及其机制研究)[J].国际免疫学杂志,2022(05):449-455
A类:
momlv
B类:
3p,EIF4G2,卵巢癌,SKOV3,DDP,顺铂耐药性,microRNA,cisplatin,mimic,NC,inhibitor,逆转录聚合酶链反应,real,reverse,transcription,qRT,western,blotting,eukaryotic,translation,initiation,gamma,CCK,流式细胞仪,野生型,突变型,质粒,miRNA,共转染,双荧光素酶报告系统,荧光素酶活性,过表达,IC50,可抑制,细胞活性,AO,EB,细胞淋巴瘤,cell,lymphoma,Bcl,associated,protein,Bax,半胱天冬酶,活性检测,检测数据,UTR,直接作用,作用靶点,MiR,靶向调控,细胞耐药
AB值:
0.217772
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