典型文献
P物质活化NK92-MI细胞脱颗粒及差异circRNA表达的研究
文献摘要:
目的:探讨神经肽P物质(substance P,SP)活化NK92-MI细胞脱颗粒作用,分析差异表达circRNA调控NK92-MI细胞可能的机制。方法:将培养后的NK92-MI细胞分为空白对照组、SP刺激组和NK-1受体拮抗剂(neurokinin-1 receptor antagonist,NK-1RA)组。荧光定量PCR(real-time quantification PCR,qRT-PCR)法检测并分析NK92-MI细胞经SP刺激后穿孔素mRNA表达的时间效应,流式细胞术检测NK92-MI细胞脱颗粒标志物CD107a的表达,高通量测序技术分析circRNA表达谱,qRT-PCR法验证差异倍数最大的circZNF609和circAMBRA1的表达。生物信息学分析circZNF609、circAMBRA1与穿孔素相关的微小RNA(microRNA,miRNA),并分析circZNF609、circAMBRA1与穿孔素mRNA表达的相关性。结果:刺激12 h后,SP刺激组穿孔素mRNA表达较对照组升高约2.06倍,刺激24 h后,穿孔素mRNA表达继续升高,约为对照组3.65倍,差异均具有统计学意义(
t值分别为4.00、4.72,
P值均<0.05);在12 h时,NK-1RA组穿孔素mRNA的表达高于对照组,差异具有统计学意义(
t=2.39,
P<0.05),但在24 h时,与对照组比较差异无统计学意义(
P>0.05)。与静息NK92-MI细胞组相比,K562刺激组、K562+SP组、K562+SP+NK-1RA组中NK92-MI细胞CD107a的表达显著升高{(0.81±0.38)%比[(9.59±2.52)%,(17.78±1.94)%,(10.19±2.04)%],
t值分别为6.27、12.19、7.83,
P值均<0.05}。SP作用NK92-MI细胞后共有9个差异表达的circRNAs:circZNF609、circAMBRA1、circCAMSAP1、circAAGAB、circLMBR1、circGNB1、circBPTF、circGPI和circCSNK1G3。NK-1RA可以阻断除circCSNK1G3外的上述8个circRNAs的表达。qRT-PCR验证circZNF609和circAMBRA1的表达与测序结果一致。生物信息学预测,circZNF609、circAMBRA1与穿孔素相关的miRNAs为miR-149-5p、miR-940和miR-942-5p。circZNF609、circAMBRA1与穿孔素mRNA的表达均呈负相关(
r值分别为-0.57、-0.74,
P值均<0.05)。
结论:SP可以通过与NK-1R结合活化NK92-MI细胞,下调circZNF609和circAMBRA1的表达,上调穿孔素mRNA的表达,促进NK92-MI细胞脱颗粒增强其杀伤功能。
文献关键词:
神经肽SP;NK92-MI细胞;环状RNA;microRNA
中图分类号:
作者姓名:
张亚南;侯殿东;傅炜昕;刘国栋;范世光;赵蔓嘉;梁再赋
作者机构:
天津医科大学朱宪彝纪念医院检验科 天津市内分泌研究所 国家卫健委激素与发育重点实验室 天津市代谢性疾病重点实验室,天津 300134;湖州师范学院医学院,浙江湖州 313000;中国医科大学科学实验中心一部,沈阳 110001
文献出处:
引用格式:
[1]张亚南;侯殿东;傅炜昕;刘国栋;范世光;赵蔓嘉;梁再赋-.P物质活化NK92-MI细胞脱颗粒及差异circRNA表达的研究)[J].国际免疫学杂志,2022(03):234-241
A类:
circZNF609,circAMBRA1,K562+SP,K562+SP+NK,circCAMSAP1,circAAGAB,circLMBR1,circGNB1,circBPTF,circGPI,circCSNK1G3
B类:
NK92,MI,细胞脱颗粒,神经肽,substance,差异表达,空白对照,受体拮抗剂,neurokinin,receptor,antagonist,1RA,real,quantification,qRT,穿孔素,时间效应,流式细胞术,CD107a,高通量测序技术,表达谱,倍数,生物信息学分析,microRNA,静息,circRNAs,断除,miRNAs,5p,颗粒增强,杀伤功能
AB值:
0.154634
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