目的 探讨半枝莲提取物对肝癌HuH-7细胞自噬的影响,并分析自噬在半枝莲提取物调节HuH-7细胞生长抑制中的作用机制.方法 分别用100、200、500、1000和1 500μg/mL浓度的半枝莲提取物以及500μg/mL半枝莲提取物+5mol/L 3-Methyladenine(3-MA)处理HuH-7细胞24 h,设不加半枝莲提取物对照组.CCK-8试验检测各组细胞活力,确定最适半枝莲提取物处理浓度,并检测半枝莲提取物及3-MA逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞活力的影响;激光共聚焦试验和Western blot法检测半枝莲提取物及3-MA逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞自噬的影响;流式细胞术检测半枝莲提取物及3-MA逆转半枝莲提取物对HuH-7细胞凋亡的影响;Western blot法检测半枝莲提取物对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响.结果 500 μg/mL半枝莲提取物抑制HuH-7细胞活性40％左右,作用浓度适中,选择该浓度处理HuH-7细胞.与对照组相比,500 μg/mL半枝莲提取物可明显诱导LC3B斑点的形成(F=2.597,P＜0.01);LC3B-Ⅱ蛋白表达明显升高(F=2.127,P＜0.01),而P62蛋白表达明显降低(F=0.589,P＜0.01).与500 μg/mL半枝莲提取物组相比,500 μg/mL半枝莲提取物+5mol/L 3-MA细胞LC3B斑点形成明显降低(F=1.180,P＜0.01);LC3B-Ⅱ蛋白表达明显降低(F=2.315,P＜0.01),而P62蛋白表达明显升高(F=0.153,P＜0.01);细胞活性明显恢复(F=1.462,P＜0.01),且细胞凋亡率明显降低(F=0.119,P＜0.01).与对照组相比,500μg/mL半枝莲提取物可明显抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性.结论 半枝莲提取物可通过激活自噬抑制肝癌HuH-7细胞生长,其机制可能与对P13K/AKT/mTOR信号通路的抑制相关.

半枝莲提取物;自噬;肝癌;PI3K/AKT/mTOR信号通路

王娟霞;鲁佳敏;吴瑞;郭佳敏;门碧莹;黄子龙

兰州大学第二医院感染科,甘肃兰州730030;兰州大学第二临床医学院,甘肃兰州730000

中国生物制品学杂志

[1]王娟霞;鲁佳敏;吴瑞;郭佳敏;门碧莹;黄子龙-.半枝莲提取物对肝癌HuH-7细胞自噬的影响及其作用机制)[J].中国生物制品学杂志,2022(12):1465-1470

半枝莲提取物,+5mol,Methyladenine

肝癌,HuH,细胞自噬,细胞生长,生长抑制,MA,不加,CCK,试验检测,细胞活力,共聚,blot,流式细胞术,PI3K,AKT,mTOR,细胞活性,适中,LC3B,斑点,P62,细胞凋亡率,P13K

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