目的:探讨miR-20a-5p对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）细胞系SH-SY5Y增殖、侵袭和迁移的影响及其调控机制。方法:将miR-20a-5p过表达及抑制基因分别转染至SH-SY5Y细胞，根据实验需要分为miR-20a-5p过表达组、NC过表达组、miR-20a-5p抑制组、NC抑制组，通过体外实验研究miR-20a-5p对NB细胞系SH-SY5Y的增殖、侵袭和迁移的影响。根据生物信息学预测软件初步预测NFKBIB（IκB β）可能为miR-20a-5p的下游靶基因，运用双荧光素酶报告实验、定量反转录PCR (qRT-PCR）、蛋白质印迹法（Western blot）验证miR-20a-5p靶向调控NFKBIB基因。通过细胞集落形成实验、CCK-8实验、细胞侵袭实验、细胞划痕实验、流式细胞术研究miR-20a-5p在SH-SY5Y细胞中增殖、侵袭和迁移的生物学功能。在mRNA水平上，运用qRT-PCR检测每组细胞中NFKBIB mRNA的表达量；用Western blot检测在每组细胞中NFKBIB、NF-κB蛋白的表达量。结果:细胞集落形成实验显示miR-20a-5p过表达组细胞集落形成数为（146±16）个，较NC过表达组（39±1）个显著增高，差异有统计学意义（ P<0. 01）。CCK-8实验结果显示miR-20a-5p过表达组较NC过表达组显著促进SH-SY5Y细胞增殖。细胞侵袭实验结果显示miR-20a-5p过表达组细胞侵袭数量为（117±5）个，较NC过表达组（55±2）个显著增多，差异有统计学意义（ P<0. 001）。细胞划痕实验结果显示miR-20a-5p过表达组细胞愈合率为（0. 56±0. 05）%，NC过表组细胞愈合率为（0. 40±0. 08）%，差异有统计学意义（ P<0. 05）。流式细胞术实验结果显示抑制miR-20a-5p后，SH-SY5Y细胞早期凋亡的细胞数较NC抑制组增多。抑制miR-20a-5p的表达后，上述实验结果与过表达miR-20a-5p时相反，差异均有统计学意义（ P<0. 05）。过表达miR-20a-5p后，qRT-PCR结果显示miR-20a-5p过表达组NFKBIB mRNA表达含量为（0. 36±0. 24），较NC过表达组（1. 00）显著降低；Western blot结果显示miR-20a-5p过表达组NFKBIB表达量为（1. 15±0. 30），较NC过表达组的表达量（1. 92±0. 31）显著降低；NF-κB表达量为（4. 17±0. 45），较NC过表达组的表达量（1. 64±0. 39）显著增加，差异均有统计学意义（ P< 0. 05）。 结论:miR-20a-5p促进NB细胞系SH-SY5Y的增殖、侵袭和迁移能力，可能是通过抑制NFKBIB的表达来激活NF-κB通路，或可作为促进NB细胞增殖、侵袭和迁移的潜在干预靶点。

神经母细胞瘤;核因子κB;增殖;侵袭;迁移

古力米热木·买买提江;刘辉;李万富;阿尔新·哈布丁;郑树涛;鹿洪亭;樊珈榕;阿依古再丽·麦麦江;王雅琦

新疆医科大学，乌鲁木齐　830054;新疆医科大学第一附属医院小儿普外科，乌鲁木齐　830054;新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院，乌鲁木齐　830054;青岛大学附属妇女儿童医院小儿外科，青岛　266034

中华小儿外科杂志

[1]古力米热木·买买提江;刘辉;李万富;阿尔新·哈布丁;郑树涛;鹿洪亭;樊珈榕;阿依古再丽·麦麦江;王雅琦-.miR-20a-5p靶向调控NFKBIB对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y增殖、侵袭和迁移的影响)[J].中华小儿外科杂志,2022(12):1075-1081

NFKBIB

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