典型文献
利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆'GE-J12'中外源基因的拷贝数
文献摘要：
为鉴定抗除草剂转基因大豆新品种'GE-J12,的外源基因插入拷贝数,以该转化体的外源插入目的基因G2-EPSPS和GAT的序列、3'转化体特异性序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针特异性进行鉴定,同时以大豆内标基因Lectin为参照,建立微滴数字PCR拷贝数检测体系.特异性试验结果显示,只有以抗除草剂转基因大豆'GE-J12'基因组DNA为模板才有扩增信号.以单株转基因大豆'GE-J12,基因组DNA为模板,进行外源目的基因G2-EPSPS和GAT、3'转化体特异性序列的微滴数字PCR检测,转基因大豆'GE-J12'的外源目的基因G2-EPSPS和GAT在基因组上的插入拷贝数均值分别为0.99和1.01.同时3'转化体特异性序列的拷贝数均值为1.00,验证单株转基因大豆'GE-J12'为纯合子,因此鉴定该单株转基因大豆'GE-J12'的外源基因在大豆基因组上为单拷贝插入,同时与Southern blot方法进行比较,结果一致.
文献关键词：
拷贝数;微滴数字PCR;转基因大豆;外源基因
中图分类号：
作者姓名：
赵新;刘双;刘娜;李瑞环;曹英芳;兰青阔;王永
作者机构：
天津市农业科学院生物技术研究所,天津300384;河北农业大学食品科技学院,河北保定071001
文献出处：
引用格式：
[1]赵新;刘双;刘娜;李瑞环;曹英芳;兰青阔;王永-.利用微滴数字PCR技术分析转基因大豆'GE-J12'中外源基因的拷贝数)[J].中国农业大学学报,2022(01):58-66
A类：
内标基因
B类：
利用微,转基因大豆,GE,J12,外源基因,拷贝数,抗除草剂,大豆新品种,基因插入,转化体,目的基因,G2,EPSPS,GAT,特异性序列,靶序列,扩增引物,TaqMan,物探,Lectin,检测体系,增信,单株,纯合子,Southern,blot
AB值：
0.220574
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
