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黑果枸杞高效植株再生与遗传转化体系的建立
文献摘要：
为建立高效的黑果枸杞组织培养与遗传转化体系,本研究以黑果枸杞叶片、茎节、茎段为外植体,在含有不同浓度组合的NAA和BAP培养基上进行愈伤组织和不定芽诱导比较;选择黑果枸杞叶片为材料,采用农杆菌介导法,将带有绿色荧光蛋白基因(sGFP)的双元表达载体导入黑果枸杞,探讨侵染时间和抗生素浓度对遗传转化效果的影响.结果表明,黑果枸杞的最适植株再生体系为:以叶片为外植体,MS基本培养基中添加0.5 mg·L-1 NAA和0.3 mg·L-1 BAP,愈伤组织诱导率为88.56％,不定芽诱导率为54.54％,将不定芽置于1/2MS培养基中进行生根诱导,生根率为95％;稳定高效的遗传转化体系为:农杆菌侵染液OD600为0.25,共培养3 d,卡那霉素(kanamycin)和羧苄西林(carbenicillin)浓度分别为25和250 mg·L-1.愈伤组织和不定芽诱导时经卡那霉素和荧光标记双重选拔,愈伤组织阳性率为85.47％,出芽生根后经PCR鉴定,阳性转化率为29％;利用实时荧光定量PCR检测转基因植株,导入的外源sGFP基因均有较高的表达水平.本研究为利用基因工程技术对黑果枸杞进行品种改良提供了技术支撑.
文献关键词：
黑果枸杞;组织培养;植株再生;遗传转化;农杆菌介导
中图分类号：
作者姓名：
张虹;安迎瑞;张君;郎思睿;陈任
作者机构：
宁夏大学生命科学学院/西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室/宁夏优势特色作物现代分子育种重点实验室,宁夏 银川 750021
文献出处：
引用格式：
[1]张虹;安迎瑞;张君;郎思睿;陈任-.黑果枸杞高效植株再生与遗传转化体系的建立)[J].核农学报,2022(05):929-936
A类：
sGFP,carbenicillin
B类：
黑果枸杞,植株再生,遗传转化体系,组织培养,枸杞叶,茎节,茎段,外植体,NAA,BAP,不定芽诱导,农杆菌介导法,绿色荧光蛋白,双元表达载体,侵染,转化效果,再生体系,基本培养基,愈伤组织诱导率,2MS,生根诱导,生根率,稳定高效,染液,OD600,共培养,卡那霉素,kanamycin,西林,时经,荧光标记,重选,出芽,转基因植株,基因工程技术,品种改良
AB值：
0.273409
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