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典型文献
菌丝霉素抗菌肽高密度发酵生产及其特性研究
文献摘要:
[目的]开发菌丝霉素抗菌肽,以替代抗生素在饲料生产中添加使用.[方法]以高产菌丝霉素毕赤酵母基因工程菌PPle-BC01为供试菌株,在15 L实验室发酵罐优化发酵工艺的基础上,通过50 L、5 t、60 t发酵罐高密度发酵工艺进一步优化放大试验,实现了60 t罐规模的稳定生产.经层析柱分离、纯化,得到相对纯度≥90%的纯品.纯品水解后的游离氨基酸样品,经PITC衍生化处理后,再经过HPLC检测及氨基酸组成摩尔百分比计算与氨基酸混合标准品比对,分析其氨基酸组成.纯品经多肽蛋白质相对分子质量分析测试,测得plectasin单同位素相对分子量.纯品经蛋白浓度、抗菌效价测定、比活计算以及产品抗菌效价测定,获得产品中plectasin含量,同时测试了解其产品特性.[结果]60 t发酵罐稳定3批次试生产发酵液菌体湿重峰值分别为43.34%、43.78%和43.78%,抗菌效价峰值分别为10566.99、10986.45和10788.56 U/mL;喷雾干燥产品收率分别为12.19%、12.30%和12.50%,抗菌效价分别为100672.10、103561.20和99765.50 U/g.3批次试生产产品中plectasin含量分别为2.26%、2.32%和2.24%.纯品经检测符合plectasin由40个氨基酸组成的多肽的理论氨基酸残基个数值,分子量为4.4407 kD.产品在95℃温度以下具有良好的热稳定性;pH 3.0~9.0具有良好的酸碱稳定性;在0.03%~0.30%猪胆盐浓度具有较好的胆盐耐受性;对胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K均具有良好的抗降解性.[结论]发酵终产品收率达10%,产品抗菌效价达8万U/g以上,产品中plectasin含量达2%以上,实现了60 t罐规模的产业化稳定生产.
文献关键词:
菌丝霉素抗菌肽;高密度发酵工艺;菌丝霉素含量检测;产品特性
作者姓名:
宋士良;陆克文
作者机构:
上海邦成生物工程有限公司,上海201506
文献出处:
引用格式:
[1]宋士良;陆克文-.菌丝霉素抗菌肽高密度发酵生产及其特性研究)[J].安徽农业科学,2022(07):78-87
A类:
菌丝霉素,菌丝霉素抗菌肽,PPle,BC01,plectasin,菌丝霉素含量检测
B类:
替代抗生素,毕赤酵母,基因工程菌,发酵罐,优化发酵,高密度发酵工艺,稳定生产,层析柱,游离氨基酸,PITC,衍生化,生化处理,再经,HPLC,氨基酸组成,摩尔,混合标准,标准品,品比,多肽,相对分子质量,质量分析,分析测试,同位素,相对分子量,蛋白浓度,效价测定,活计,产品特性,试生产,发酵液,菌体,湿重,喷雾干燥,产品收率,经检测,氨基酸残基,kD,热稳定性,酸碱,碱稳定性,胆盐,盐浓度,耐受性,胃蛋白酶,胰蛋白酶,抗降解,降解性
AB值:
0.292228
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