基于莪术醇对肝星状细胞自噬和凋亡的影响作用,希冀阐明其抗肝纤维化作用的分子机制.将肝星状细胞分为5组,对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)10 ng·mL-1组、莪术醇不同浓度(12.5、25、50 mg·L-1)组.使用MTT试剂盒检测莪术醇对TGF-β1诱导肝星状细胞活力的影响;借助细胞流式检测各组细胞凋亡发生情况;实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)检测各组α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ型(collagen Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ型(collagenⅢ)mRNA表达情况;Western blot检测各组p62、微管相关蛋白轻链3(microtu-bule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、beclin1、B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 related X protein,Bax)表达情况;透射电镜观察各组细胞形态和自噬小体形成情况;双荧光标记腺病毒感染细胞后,观察各组细胞自噬流发生情况.细胞活力检测实验发现,与TGF-β1组相比,莪术醇各组细胞活力显著下降.细胞凋亡实验发现,莪术醇各组较TGF-β1组细胞凋亡率显著增加.实时荧光定量PCR实验发现,莪术醇各组α-SMA、collagen Ⅰ、collagenⅢ mRNA表达较TGF-β1组显著下降.Western blot实验发现,莪术醇各组p62、LC3、beclin1、Bcl-2、Bax表达较TGF-β1组具有明显差异.透射电镜发现莪术醇各组自噬小体数量较TGF-β1组显著增加.双荧光标记腺病毒检测自噬流发现莪术醇各组自噬溶酶体数量较TGF-β1组显著增加.莪术醇可以诱导肝星状细胞自噬和凋亡,可能是其抗肝纤维化的作用机制之一.

莪术醇;肝纤维化;肝星状细胞;自噬;凋亡

郑洋;徐灿丽;卢能源;邱菲菲;赵颖杰;常玉线;王佳慧;赵铁建;原鲜玲

广西中医药大学赛恩斯新医药学院医学系,广西南宁530222;广西中医药大学教学实验实训中心,广西南宁530222

中国中药杂志

[1]郑洋;徐灿丽;卢能源;邱菲菲;赵颖杰;常玉线;王佳慧;赵铁建;原鲜玲-.基于肝星状细胞自噬和凋亡探讨莪术醇抗肝纤维化的作用机制)[J].中国中药杂志,2022(03):730-736

肝星状细胞,细胞自噬,莪术醇,抗肝纤维化,希冀,转化生长因子,transforming,growth,TGF,MTT,试剂盒,细胞活力,助细胞,real,fluorescence,quantitative,平滑肌肌动蛋白,alpha,smooth,muscle,actin,SMA,胶原蛋白,collagen,blot,p62,微管,轻链,microtu,bule,associated,protein,light,chain,LC3,beclin1,细胞淋巴瘤,cell,lymphoma,Bcl,related,Bax,透射电镜,电镜观察,细胞形态,自噬小体,双荧光,荧光标记,腺病毒感染,自噬流,细胞凋亡率,病毒检测,自噬溶酶体

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