马立克氏病病毒(MDV)引起的鸡马立克氏病(MD)可用疫苗进行防御,但疫苗无法阻止MDV对鸡的感染以及MDV的传播和毒力的增强,MD仍为养禽业的重要威胁.而抑制细胞内MDV增殖是增强疫苗防御效果的重要策略,化学药物无疑是重要的选择之一.本研究在前期研究基础上,以MDV编码的去泛素化酶UL36为靶点,经高通量筛选,从蛋白酶抑制剂库中筛选出对UL36去泛素化酶的活性具有抑制作用的化合物LDN57444,应用酶抑制动力学方法揭示,LDN57444以非竞争性方式抑制UL36去泛素化酶活性,IC50为3.10 μmol/L.同源建模结合分子对接分析发现,LDN57444结合于UL36-480的C末端口袋中,通过氢键、Pi-Sigma作用、Pi-Pi堆积作用、Pi-Alkyl作用等方式与UL36-480互作,进而抑制UL36-480的活性.进一步在细胞水平,应用MDV致CEF的CPE模型分析LDN57444对MDV在CEF细胞中的增殖的抑制作用,结果发现,5,20 μmol/L的LDN57444可显著抑制CPE的形成,并抑制MDV在CEF细胞内的增殖(P＜0.01).同时,应用MD鸡模型分析LDN57444是否可以抑制MDV在鸡体内的增殖,结果发现,每日高于0.5 mg/kg给药可显著抑制MDV在鸡体内的增殖(P＜0.01).本研究结果表明,化合物LDN57444可以抑制MDV在细胞及动物体内增殖,为进一步研制抗MD药物提供了可靠的依据.

去泛素化酶UL36;马立克氏病病毒;抑制剂LDN57444;CEF细胞

王文婧;范青松;刘宇航;王婷;邓国辉;谢知航;王梦涵;吕岩;许家翠;艾永兴

吉林大学动物科学学院人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林长春130062

中国兽医学报

[1]王文婧;范青松;刘宇航;王婷;邓国辉;谢知航;王梦涵;吕岩;许家翠;艾永兴-.去泛素化酶UL36的抑制剂LDN57444抑制马立克氏病病毒的增殖)[J].中国兽医学报,2022(10):1949-1957

UL36,LDN57444

去泛素化酶,马立克氏病病毒,MDV,鸡马立克氏病,毒力,养禽业,化学药物,前期研究,高通量筛选,蛋白酶抑制剂,酶抑制动力学,非竞争性,IC50,同源建模,分子对接,端口,口袋,袋中,氢键,Pi,Sigma,堆积作用,Alkyl,CEF,CPE,动物体

0.175444