典型文献
耐药基因bla TEM-1、bla IMP-3、fosA3多重重组聚合酶扩增(RPA)快速检测方法的建立和应用
文献摘要：
为了建立同时检测多种耐药基因的快速检测方法,本研究以blaTEM-1、blaIMP-3、fosA3基因保守序列设计特异性引物,经优化反应条件,建立恒温检测上述3种耐药基因的多重重组聚合酶扩增(RPA)方法.条件优化结果显示,所建立的RPA方法在引物浓度为480 mmol/L,37℃恒温反应20 min时检测效果最佳.该方法对携带blaTEM-1、bla IMP-3、fosA3基因的菌株能扩增出条带,阴性菌株无条带,特异性高;对blaTEM-1、blaIMP-3基因的最低检出限为1.8×101拷贝/μL,对fosA3基因的最低检出限为1.8×102拷贝/μL,敏感性较强.用多重RPA方法对浙江省内水产养殖环境及生物体中分离到的400株菌株进行检测,养殖用水分离菌株的blaTEM-1、bla IMP-3和fosA 3检出率分别为 81.00％(81/100),11.00％(11/100)和 29.00％(29/100);水产动物体内分离菌株的 blaTEM-1、blaIMP-3 和fosA3检出率分别为73.67％(221/300),1.33％(4/300)和23.33％(70/300),与常规PCR基本一致.建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测限低、结果可靠,适用于多种耐药基因的快速检测,为快速摸清养殖产业链各环节的耐药基因谱,减少耐药基因传播,保障食品安全提供了技术支撑.
文献关键词：
多重重组酶聚合酶扩增;快速检测;耐药基因
中图分类号：
作者姓名：
朱凝瑜;贺泽;梁倩蓉;郑晓叶;丁雪燕;曲道峰
作者机构：
浙江省水产技术推广总站,浙江杭州310012;浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品安全重点实验室,浙江杭州310018
文献出处：
引用格式：
[1]朱凝瑜;贺泽;梁倩蓉;郑晓叶;丁雪燕;曲道峰-.耐药基因bla TEM-1、bla IMP-3、fosA3多重重组聚合酶扩增(RPA)快速检测方法的建立和应用)[J].中国兽医学报,2022(05):956-961
A类：
fosA3,多重重组酶聚合酶扩增
B类：
耐药基因,RPA,快速检测方法,建立和应用,同时检测,blaTEM,blaIMP,保守序列,序列设计,特异性引物,优化反应,反应条件,恒温,条件优化,检测效果,条带,阴性菌,低检出限,拷贝,水产养殖环境,生物体,水分离,分离菌株,水产动物,动物体,检测限,摸清,养殖产业链,食品安全
AB值：
0.215276
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