为了解东北地区狐源大肠杆菌的耐药性及其整合子—基因盒系统的流行特征,本研究采用K-B纸片法检测东北地区分离的330株狐源大肠杆菌对6类15种抗菌药物的敏感性;通过PCR检测这些分离菌株中Ⅰ类整合酶基因(intI1)、Ⅱ整合酶基因(intI2)和Ⅰ类、Ⅱ类整合子基因并测序,采用DNAStar软件分析Ⅰ类、Ⅱ类整合子基因携带基因盒的组成方式,根据PCR结果分析整合酶及整合子基因与大肠杆菌耐药表型的相关性.药敏试验结果显示:330株狐源大肠杆菌对β-内酰胺类药物和四环素类药物耐药性较高,耐药菌株均超过80％;其次是对氨基糖苷类药物和磺胺类药物,耐药菌株超过60％;对β-内酰胺类药物亚胺培南、氨基糖苷类药物阿米卡星相对敏感,敏感菌株分别占86.97％(287/330)和83.94％(277/330),且87.88％(290/330)的狐源大肠杆菌表现为多重耐药性.整合酶和整合子基因的检测结果显示,intI1和intI2基因的检出率分别为63.64％(210/330)和15.45％(51/330),且有36株(10.9％)狐源大肠杆菌同时携带intI1和intI2基因.Ⅰ类整合子基因的检出率为62.86％(207/330),其中33.81％(70/207)Ⅰ类整合子基因中携带基因盒,其余66.19％(137/207)Ⅰ类整合子基因中未携带基因盒,为空整合子,且未检出Ⅱ类整合子基因;70个Ⅰ类整合子基因的测序结果显示,共检测出10种基因盒,且存在6种不同的基因盒组成方式,其中aadA22基因盒数量最多,达48.57％(34/70),其余基因盒组成分别为dfrA17-aadA5、dfrA27-aadA2、dfrA5、dfrA1-aadA1、dfrA12-orfF-aadA2.且上述整合酶基因(与氨基糖苷类和磺胺类耐药基因相关)及整合子基因(与甲氧苄啶类和氨基糖苷类药物的耐药性相关,但未做甲氧苄啶类的耐药性试验)与狐源大肠杆菌对氨基糖苷类和磺胺类药物的耐药表型基本一致.以70株携带基因盒的Ⅰ类整合子的狐源大肠杆菌为供体菌,E.coli NK5449株作为受体菌进行接合转移试验,提取接合子质粒并经PCR测序后统计接合率;通过PCR分别检测接合子携带的整合酶和整合子基因,分析接合子中耐药基因的水平转移情况.结果显示,共获得23株接合子,接合率为32.86％(23/70),23株接合子中Ⅰ类整合酶基因的检出率为34.78％(8/23),Ⅰ类整合子基因检出率为43.48％(10/23).上述结果表明,耐药基因具有水平转移的能力,但并不能将全部的耐药基因转移到受体菌中.本研究为东北地区狐源大肠杆菌的风险评估和抗菌药的合理应用提供参考依据.

狐;大肠杆菌;耐药性;整合子;基因盒

闫爽;冯涛;王东阳;李雪惠;薛原

东北林业大学野生动物与自然保护地学院,黑龙江 哈尔滨 150040

中国预防兽医学报

[1]闫爽;冯涛;王东阳;李雪惠;薛原-.东北地区狐源大肠杆菌耐药性、整合酶及整合子基因的检测与相关分析)[J].中国预防兽医学报,2022(04):439-444

aadA22,dfrA27,dfrA5,orfF,NK5449

大肠杆菌,整合子基因,基因盒,流行特征,纸片法,抗菌药物,分离菌株,整合酶基因,intI1,intI2,DNAStar,耐药表型,药敏试验,内酰胺,酰胺类,四环素类药物,药物耐药性,耐药菌株,氨基糖苷类药物,磺胺类药物,亚胺培南,阿米卡星,星相,多重耐药性,未检,dfrA17,aadA5,aadA1,dfrA12,耐药基因,甲氧苄啶,供体,coli,接合转移,质粒,水平转移,移情,共获,基因转移,合理应用

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