目的 研究第二信使分子环鸟苷酸腺苷酸(cGAMP)对日本血吸虫感染小鼠肝虫卵肉芽肿形成及纤维化的影响,并初步阐明其调控机制.方法 将C57BL/6小鼠随机分为cGAMP处理组(8只)、感染对照组(28只)、感染cGAMP处理组(28只).cGAMP处理组尾静脉单独注射cGAMP(2 μg,100 μl),感染对照组和感染cGAMP处理组经腹部皮肤贴片感染日本血吸虫尾蚴[(20±2)条/鼠]后,分别经尾静脉注射PBS(100 μl)和cGAMP(2 μg,100 μ1),每周1次.3组小鼠各8只分别注射10次,每次注射后观察小鼠死亡情况.感染对照组和感染cGAMP处理组小鼠(各5只)于感染后7周,取小鼠眼眶血,ELISA检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)与天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;取小鼠肝组织切片进行苏木精-伊红染色(HE)和Masson染色,计算单个虫卵肉芽肿面积和肝纤维化面积,并计数肝组织虫卵数.感染对照组和感染cGAMP处理组小鼠(各15只)于感染后0、4和7周,取小鼠肝组织,提取总RNA,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝组织β干扰素(IFN-β)编码基因Ifnib1的表达水平;取小鼠眼眶血,ELISA检测血清中IFN-β水平.采用GraphPad Prism 8.0.2软件进行统计学分析,两组间比较采用t检验.结果 cGAMP处理组小鼠无死亡;感染后10周,感染对照组小鼠死亡2只,感染cGAMP处理组小鼠死亡5只,两组差异有统计学意义(x2=7.55,P＜0.01).感染对照组和感染cGAMP 处理组小鼠血清 ALT 分别为(394.80±72.82)和(627.20±93.58)U/L(t=4.38,P＜0.01),血清 AST分别为(605.00±148.90)和(871.80±138.10)U/L(t=2.94,P＜0.05).感染对照组和感染 cGAMP 处理组小鼠肝组织虫卵数分别为50 600±15 473和53400±16 273,差异无统计学意义(t=0.28,P＞0.05);HE染色结果显示,感染对照组和感染cGAMP处理组均出现明显的肝组织结构被破坏,并有炎性细胞浸润,肝组织病理损害比例分别为(35.32±15.09)％和(64.98±13.91)％(t=3.23,P＜0.05);肝组织虫卵肉芽肿面积分别为(0.57±0.45)和(1.17±0.74)mm2(t=2.95,P＜0.01);Masson 染色结果显示,感染对照组和感染 cGAMP 处理组小鼠均发生肝纤维化,比例分别为(24.50±6.39)％与(39.02±6.79)％(t=3.48,P＜0.01).感染后4和7周,感染cGAMP处理组小鼠肝组织中Ifnibl mRNA的相对表达量分别为16.58±6.71和10.52±2.88,较感染对照组的9.280±4.50和6.62±1.58均上调(t=2.95、2.18,P＜0.05);感染cGAMP处理组小鼠血清IFN-β 的含量分别为(1 206.45±211.87)和(960.62±151.33)pg/ml,较感染对照组的(845.12±284.11)和(685.20±143.88)pg/ml均上调(t=2.28、2.95,P＜0.05).结论 cGAMP可促日本血吸虫感染小鼠肝虫卵肉芽肿形成及纤维化,通过诱导IFN-Ⅰ发挥免疫调控作用.

日本血吸虫;环鸟苷酸腺苷酸;干扰素基因刺激蛋白;Ⅰ型干扰素

梁乐;张璟;沈玉娟;胡媛;曹建平

中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心),国家卫生健康委寄生虫病原与媒介生物学重点实验室,世界卫生组织热带病合作中心,国家级热带病国际联合研究中心,上海200025;上海健康医学院,上海201328

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

[1]梁乐;张璟;沈玉娟;胡媛;曹建平-.环鸟苷酸腺苷酸促日本血吸虫感染小鼠肝虫卵肉芽肿形成及纤维化)[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2022(04):441-445,453

环鸟苷酸腺苷酸,肝虫卵肉芽肿,Ifnib1,Ifnibl

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