典型文献
利用PiggyBac转座子系统构建表达△15 Des酶活性的转基因小鼠
文献摘要：
必需脂肪酸为人体健康和生命所必需,但机体自身不能合成,研究表明ω-3族脂肪酸对人体的生理功能有更加积极的影响.哺乳动物体内缺乏ω-3去饱和酶的基因,来自线虫Caenorhabditis elegans的△15-脂肪酸去饱和酶(△15 Des)可以将体内ω-6多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)转化为ω-3 PUFAs.利用PiggyBac转座子(PB)系统构建表达A15 Des酶活性的转基因小鼠可以在较短时间内繁育出稳定遗传的纯合子转基因小鼠,整合率高达35.1％.饲料中添加6％ ω-6 PUFAs饲喂小鼠,通过气相色谱(gas chromatography,GC)检测小鼠体内脂肪酸的变化,荧光定量PCR (quantitative PCR,qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)来检测△15 Des在小鼠体内的表达水平.从qPCR和GC结果分析,阳性小鼠的基因活性率为61.53％,与传统方法相比,△15 Des的转入效率及活性都显著提高,且纯合子比杂合子表达更高的活性,进一步验证了PiggyBac转座子系统高效的转导效率和安全稳定性.
文献关键词：
多不饱和脂肪酸;15脂肪酸去饱和酶;转座子;转基因
中图分类号：
作者姓名：
王颖;杨仕赛;赵瑄;李亚;吕露露;朱贵明
作者机构：
贵州医科大学生物与工程学院生物与医学工程重点实验室,贵州贵阳550025;贵州医科大学生物与工程学院医药生物技术工程研究中心,贵州贵阳550025
文献出处：
引用格式：
[1]王颖;杨仕赛;赵瑄;李亚;吕露露;朱贵明-.利用PiggyBac转座子系统构建表达△15 Des酶活性的转基因小鼠)[J].生物工程学报,2022(01):196-206
A类：
B类：
PiggyBac,转座子,系统构建,建表,Des,转基因小鼠,必需脂肪酸,人体健康,生理功能,哺乳动物,动物体,去饱和,线虫,Caenorhabditis,elegans,多不饱和脂肪酸,polyunsaturated,fatty,acids,PUFAs,PB,A15,繁育,稳定遗传,纯合子,饲喂,过气,gas,chromatography,内脂,quantitative,qPCR,蛋白免疫印迹,blotting,WB,活性率,转入,杂合子,转导效率,安全稳定性
AB值：
0.330472
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