目的 研究半枝莲总黄酮(TF-SB)对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的影响和分子机制.方法 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测TF-SB(0、25、50、100、200μg·mL-1)作用24 h对AGS细胞存活率的影响.将AGS细胞分为对照组、溶剂对照(含相同浓度的甲醇)组、TF-SB(100μg·mL-1)组、质粒空载体(pcDNA,200nmol·L-1)组、迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)过表达质粒(pcDNA-MIIP,200nmol·L-1)组、TF-SB(100 μg·mL-1)+小干扰RNA对照(si-con,200nmol·L-1)组、TF-SB(100μg·mL-1)+MIIP小干扰RNA(si-MIIP,200nmol·L-1)组,转染质粒后TF-SB处理24h,CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-x1(Bcl-x1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleavedCaspase-3)、MIIP表达;不同照射量X射线(0、2、4、6、8 Gy)照射后,克隆形成实验检测细胞存活率,并绘制单击多靶模型拟合曲线,Western blotting法检测γ-H2AX蛋白表达.结果 与TF-SB 0 μg·mL-1组比较,TF-SB25、50、100、200μg·mL-1组AGS细胞存活率显著降低(P＜0.05);与对照组及溶剂对照组比较,TF-SB 100 μg·mL-1组AGS细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),Bcl-x1蛋白表达显著降低(P＜0.05),cleaved Caspase-3和MIIP蛋白表达显著升高(P＜0.05);放疗后,TF-SB组细胞存活率显著降低(P＜0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P＜0.05),放疗敏感性增加.与pcDNA组比较,pcDNA-MIIP组AGS细胞凋亡率显著增加,细胞存活率显著降低,Bcl-x1蛋白表达显著降低,cleaved Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05);放疗后,pcDNA-MIIP组细胞存活率显著降低(P＜0.05),γ-H2AX蛋白表达显著升高(P＜0.05),敏感性增加.与TF-SB+si-con组比较,TF-SB+si-MIIP组AGS细胞凋亡率显著降低,细胞存活率显著增加,Bcl-x1蛋白表达显著增加,cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P＜0.05);放疗后,TF-SB+si-MIIP组细胞存活率显著升高(P＜0.05),γ-H2AX蛋白表达显著降低(P＜0.05),敏感性降低.结论 TF-SB通过上调MIIP可抑制AGS细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高其放疗敏感性.

半枝莲总黄酮;人胃腺癌细胞AGS;迁移侵袭抑制蛋白(MIIP);细胞增殖;凋亡;放疗敏感性

张锋;吴震;徐宁;杜红蕾;郭海彦

河北省保定市第二中心医院,河北保定 071000

药物评价研究

[1]张锋;吴震;徐宁;杜红蕾;郭海彦-.半枝莲总黄酮调控MIIP对人胃腺癌细胞AGS增殖、凋亡和放疗敏感性的作用及机制研究)[J].药物评价研究,2022(04):686-692

200nmol,+MIIP,SB25,SB+si

半枝莲总黄酮,胃腺癌,癌细胞,AGS,放疗敏感性,TF,试剂盒,CCK,细胞存活率,空载,pcDNA,迁移侵袭,过表达质粒,小干扰,con,转染,24h,流式细胞术,blotting,细胞淋巴瘤,x1,Bcl,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,cleavedCaspase,照射量,Gy,克隆形成,实验检测,制单,单击,模型拟合,拟合曲线,H2AX,细胞凋亡率,放疗后,可抑制

0.136688