典型文献
利用NASH大鼠原代肝细胞与原代Kupffer细胞共培养建立NASH原代细胞模型
文献摘要：
目的:通过分离并提纯非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠原代肝细胞以及原代Kupffer细胞建立体外NASH原代细胞模型,为研究NASH提供可靠的细胞实验技术支持.方法:选择SD大鼠40只,随机分为2组(n=20):对照组和NASH组,对照组大鼠利用普通饲料喂养,NASH组大鼠利用高脂饲料(88％基础饲料+10％猪油+2％胆固醇)喂养,6～8周后,利用NASH评分表,病理观察下肝组织切片脂肪变+小叶内炎症+气球样变评分≥4分,表明大鼠NASH模型的成功建立,利用胶原酶原位灌注法分离并提纯NASH模型大鼠原代肝细胞以及原代Kupffer细胞,利用CK-18及CD68免疫荧光以及墨汁吞墨实验进行细胞鉴定,利用油红O染色、试剂盒测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量观察NASH大鼠原代肝细胞脂质累积和肝功情况,Western blot检测原代Kupffer细胞炎症因子表达情况,最后采用原代肝细胞:原代Kupffer细胞=6:1比例共培养,显微镜下观察细胞状态.结果:实验成功分离并提纯NASH原代肝细胞以及原代Kupffer细胞,通过油红O染色,NASH组大鼠原代肝细胞存在明显的脂肪沉积,且NASH组大鼠原代肝细胞中AST、ALT明显高于对照组,存在明显肝损伤(P<0.05),Western blot测定原代Kupffer细胞TNF-α、IL-1β以及MCP-1,NASH组大鼠明显高于对照组(P<0.05).结论:通过胶原酶原位灌注法可以成功分离NASH大鼠原代肝细胞以及原代Kupffer细胞,同时成功建立比例共培养大鼠体外原代细胞NASH模型.
文献关键词：
非酒精性脂肪性肝炎;大鼠;原代肝细胞;原代Kupffer细胞
中图分类号：
作者姓名：
吴霞;张玉蓉;朱晓宁;汪静
作者机构：
西南医科大学中西医结合学院,四川 泸州646000;西南医科大学附属中医医院肝胆病科,四川 泸州646000
文献出处：
引用格式：
[1]吴霞;张玉蓉;朱晓宁;汪静-.利用NASH大鼠原代肝细胞与原代Kupffer细胞共培养建立NASH原代细胞模型)[J].中国应用生理学杂志,2022(02):187-192
A类：
B类：
NASH,大鼠原代肝细胞,Kupffer,细胞共培养,原代细胞,细胞模型,提纯,非酒精性脂肪性肝炎,细胞实验,实验技术,喂养,高脂饲料,+10,猪油,+2,评分表,病理观察,肝组织,组织切片,脂肪变,小叶,气球,明大,胶原酶,酶原,模型大鼠,CD68,免疫荧光,墨汁,细胞鉴定,用油,试剂盒,谷丙转氨酶,ALT,谷草转氨酶,AST,累积和,肝功,blot,细胞炎症因子,显微镜下,细胞状,功分,过油,脂肪沉积,肝损伤,MCP,养大
AB值：
0.22571
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