目的:探究薯蓣皂苷(Dioscin)诱导人结肠癌HCT-116细胞、RKO细胞凋亡的作用及机制.方法:通过将体外培养的HCT-116细胞和RKO细胞分为对照组和不同浓度的药物组,采用CCK-8实验分析Dioscin对细胞增殖的抑制作用,可见分光光度法检测细胞LDH活性的变化;借助DNA含量检测法、Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞术检测细胞凋亡情况;DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧簇(ROS)含量的变化;采用荧光探针法和可见分光光度法分别检测细胞超氧化物含量及细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达情况.结果:在24 h、48 h处理时间下,与对照组相比,HCT-116细胞Dioscin组(2、4、6、8、10μmol/L)、RKO细胞Dioscin组(5、10、15、20、25μmol/L)都明显抑制了结肠癌细胞的增殖活性(均P<0.05),且HCT-116、RKO细胞经Dioscin处理后,细胞膜破坏,细胞LDH释放量较对照组增多(P<0.05,P<0.01);与对照组相比,Dioscin作用HCT-116、RKO细胞后,DNA含量暴露增多(P<0.05,P<0.001),细胞凋亡率上调(P<0.001,P<0.01),ROS水平升高(P<0.05,P<0.001),超氧化物含量增多(均P<0.001),SOD表达降低(P<0.05,P<0.001);Western印迹结果表明,与对照组相比,Dioscin可以抑制HCT-116、RKO细胞蛋白p-Akt(P<0.01,P<0.001)、Nrf2(均P<0.001)、Bcl-2(均P<0.001)的表达,促进蛋白cleaved Caspase-9(P<0.001,P<0.01)的表达.结论:薯蓣皂苷可能通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路激活氧化应激反应,从而抑制结肠癌细胞生长,促进其凋亡.

薯蓣皂苷;结肠癌;细胞凋亡;氧化应激;Nrf2

管君;荀敬;王波涛;张琦;王西墨

天津医科大学研究生院,天津300070;天津市南开医院,天津市急腹症器官损伤与中西医修复重点实验室,天津300100

天津医科大学学报

[1]管君;荀敬;王波涛;张琦;王西墨-.薯蓣皂苷对人结肠癌细胞凋亡的作用及机制研究)[J].天津医科大学学报,2022(05):483-490

Dioscin

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