目的 检测环状核糖核酸(circular RNA,cicrRNA)hsa_circ_0006950在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)中的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖、迁移的影响及其潜在分子作用机制.方法 利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa_circ_0006950在胰腺癌组织及细胞中的相对表达水平;转染hsa_circ_0006950干扰载体构建低表达细胞系,通过CCK-8实验、克隆斑点形成实验和Transwell实验检测hsa_circ_0006950对胰腺癌细胞增殖、克隆形成及迁移的影响;利用生物信息学网站预测hsa_circ_0006950的miRNA分子靶标及其调控网络(hsa_circ_0006950-miR-124-3p-EZH2),双荧光素酶基因报告实验验证hsa_circ_0006950和miR-124-3p,miR-124-3p和EZH2的靶向结合关系;转染过表达/干扰miR-124-3p和过表达EZH2细胞系,探究miR-124-3p和EZH2及hsa_circ_0006950调控miR-124-3p/EZH2轴对胰腺癌细胞克隆形成及迁移的影响.结果 胰腺癌组织中hsa_circ_0006950表达明显高于癌旁正常组织(3.57±0.52 vs 1.01±0.03),差异有统计学意义(t=21.980,P<0.001).胰腺癌细胞PANC-1(7.51±0.62),AsPC-1(5.26±0.45),Capan-2(3.69±0.38),SW1990(3.25±0.32)and BXPC-3(3.86±0.35)中hsa_circ_0006950相对表达明显高于正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7(1.00±0.01)中的表达,差异有统计学意义(F=88.585,P<0.001).与对照组相比,干扰hsa_circ_0006950表达组细胞增殖能力(0.79±0.17 vs 1.83±0.42),克隆形成率(51.42％±5.84％vs 78.76％±13.65％)和迁移数目(104.64±24.73 vs 218.21±31.57)明显降低,差异均有统计学意义(t=3.976,3.190,4.905,P=0.016,0.033,0.008).miR-124-3p是hsa_circ_0006950的下游靶基因,EZH2是miR-124-3p的直接靶标.hsa_circ_0006950靶向负调控miR-124-3p,miR-124-3p靶向负调控EZH2.与对照组相比,过表达miR-124-3p组PC细胞增殖(0.21±0.16 vs 1.75±0.47),克隆形成率(47.85％±4.13％vs 81.54％±2.33％)和细胞迁移数目(118.74±24.65 vs 202.36±31.45)明显降低,差异均有统计学意义(t=5.378,14.317,3.390,均P<0.001);共转染过表达EZH2后,miR-124-3p对细胞增殖、克隆形成率及迁移能力的抑制作用被逆转.在干扰hsa_circ_0006950组细胞中同时下调miR-124-3p或过表达EZH2后,hsa_circ_0006950对细胞克隆形成及迁移的抑制作用被逆转恢复.结论 胰腺癌中hsa_circ_0006950显著高表达,抑制其表达可以抑制胰腺癌细胞的增殖及迁移;hsa_circ_0006950可能通过靶向下调miR-124-3p表达,进而上调EZH2表达来发挥作用,参与胰腺癌的发生发展.

胰腺癌;hsa_circ_0006950;微小核糖核酸-124-3p;EZH2;增殖;克隆形成;迁移

王军堂;齐普良;张金刚;阿吉德;何婧

青海省人民医院急诊外科,西宁 810007;青海省人民医院普外科,西宁 810007;武警青海省总队医院内二科,西宁 810014

现代检验医学杂志

[1]王军堂;齐普良;张金刚;阿吉德;何婧-.hsa_circ_0006950调控miR-124-3p/EZH2轴促进胰腺癌细胞增殖与迁移的机制研究)[J].现代检验医学杂志,2022(05):93-99

hsa,3p,EZH2,胰腺癌细胞,环状核糖核酸,circular,cicrRNA,pancreatic,cancer,分子作用机制,qRT,胰腺癌组织,相对表达,干扰载体,载体构建,低表达,细胞系,CCK,斑点,Transwell,实验检测,利用生物,miRNA,分子靶标,调控网络,双荧光素酶,酶基因,过表达,细胞克隆形成,癌旁,正常组织,PANC,AsPC,Capan,SW1990,BXPC,胰腺导管,导管上皮细胞,HPDE6,C7,细胞增殖能力,迁移数,靶基因,负调控,细胞迁移,共转染,迁移能力,时下,细胞的增殖,达来,微小核糖核酸

0.214887