目的 探究长链非编码核糖核酸(long non-coding RNAs,LncRNAs)NEAT1/miR-23b-3p/KLF3调控轴对结直肠癌细胞生物学功能的影响.方法 利用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析结直肠癌组织和癌旁组织NEAT1,miR-23b-3p和KLF3表达水平,并计算三者之间的相关性.以结直肠癌细胞系(HT29细胞)作为实验对象,实验被分为Control组(空白对照组)、NC组(空载体组)和si-NEAT1组(NEAT1干扰组).CCK8检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各组细胞的凋亡、周期情况,Transwell检测各组细胞的侵袭情况,划痕实验检测各组细胞的迁移情况.在线工具starbase等预测能与miR-23b-3p靶向结合的基因,采用人胚胎肾细胞293(human embryonic kidney cells 293,HEK293)进行双荧光素酶报告基因实验验证.qRT-PCR检测NC组、si-NEAT1组、si-NEAT1+miR-23b-3p inhibitor组(共转染si-NEAT1和miR-23b-3p inhibitor)的miR-23b-3p和KLF3转录水平,免疫印记法检测以上三组KLF3蛋白质表达水平.结果 结直肠癌组织NEAT1[5.29(4.55,5.95)],KLF3[4.94(4.62,5.24)]表达高于癌旁组织[4.79(4.26,5.19),4.49(4.24,4.80)],差异有统计学意义(U=6677,P=0.001;U=28257.5,P<0.001),miR-23b-3p表达低于癌旁组织[9.99(9.49,10.6)vs 10.80(10.62,10.88)],差异有统计学意义(U=2906,P=0.004).结直肠癌组织中,NEAT1和KLF3表达呈正相关(r=0.26,P<0.01),miR-23b-3p和NEAT1,KLF3表达量均呈负相关(r=-0.14,P=0.008;r=-0.17,P=0.001).与对照组相比,si-NEAT1组使结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的能力降低,凋亡增加,细胞被阻滞在S期,结果差异均有统计学意义(均P<0.05).starbase预测miR-23b-3p靶基因为NEAT1和KLF3.双荧光素酶报告基因实验也证实miR-23b-3p分子能互补结合NEAT1和KLF33'UTR.与NC组相比,si-NEAT1组miR-23b-3p表达上调,KLF3转录和蛋白水平下调;与si-NEAT1组相比,si-NEAT1+miR-23b-3p inhibitor组miR-23b-3p表达下调,KLF3转录和蛋白水平上调.结论 NEAT1可通过直接靶向HT29细胞中的miR-23b-3p上调KLF3表达,增强结直肠癌细胞的增值、侵袭和迁移等.

结直肠癌;长链非编码核糖核酸;竞争性内源核糖核酸;细胞增殖;细胞迁移

胡道军;史文杰;孙敏

上海市新华医院崇明分院检验科,上海 202150;桂林市中医医院乳腺外科,广西桂林 541002;湖北医药学院附属医院太和医院普外科,湖北十堰 442000

现代检验医学杂志

[1]胡道军;史文杰;孙敏-.LncRNA NEAT1/miR-23b-3p/KLF3轴调控结直肠癌细胞的生物学功能研究)[J].现代检验医学杂志,2022(04):1-6,80

KLF3,NEAT1+miR,KLF33,竞争性内源核糖核酸

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