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基于分子对接及实验验证研究补肾健脾活血方通过Wnt信号通路防治骨质疏松症的作用机制
文献摘要：
目的:通过分子对接技术及细胞实验探究补肾健脾活血方对过表达Wnt信号通路抑制性蛋白Dick-kopf相关蛋白1(DKK-1)及硬化蛋白(Sost)的MG63细胞中Wnt信号通路相关蛋白表达的影响,以探究补肾健脾活血方防治骨质疏松症(OP)的作用机制.方法:从TCMSP、BATMAN、Uniport数据库中筛选转化补肾健脾活血方的有效成分,GeneCards数据库中检索OP相关靶点,构建"成分-靶点-疾病"网络,使用CytoNCA插件对网络进行拓扑分析,筛选核心药物成分,使用Autodock Tools对有效成分与DKK-1及Sost进行分子对接计算;使用含药血清培养通过过表达质粒转染上述两种抑制性蛋白转染的MG63细胞,微量酶标法测定血清干预后细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,流式细胞仪检测细胞钙离子浓度,Western blotting法检测Wnt3a、β-catenin的表达.结果:补肾健脾活血方主要活性成分中排名前5的活性成分与DKK-1均具有较好的结合活性,有2种成分与Sost具有较好的结合活性;ALP水平方面,除空载对照组外,经含药血清干预的细胞ALP水平较空白血清干预细胞升高(P<0.01);含药血清干预的各组细胞钙离子浓度均较经空白血清干预细胞降低(P<0.05);除过表达DKK-1+Sost组外,含药血清干预的细胞中Wnt3a及β-catenin蛋白水平较空白血清干预的细胞升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论:补肾健脾活血方可能通过提高Wnt3a蛋白的表达量,抑制DKK-1及Sost对Wnt信号通路的抑制作用,影响成骨细胞中Wnt信号通路的表达,从而提高成骨细胞的活性及分化能力,以防治OP.
文献关键词：
骨质疏松症;补肾健脾活血方;Wnt信号通路;分子对接;Dickkopf相关蛋白1;硬化蛋白;MG63细胞
中图分类号：
作者姓名：
吴睿哲;吴洁;刘凯;葛殊玮;伍强;曾景奇;王凡
作者机构：
湖南中医药大学第二附属医院,湖南 长沙 410005
文献出处：
引用格式：
[1]吴睿哲;吴洁;刘凯;葛殊玮;伍强;曾景奇;王凡-.基于分子对接及实验验证研究补肾健脾活血方通过Wnt信号通路防治骨质疏松症的作用机制)[J].中医药导报,2022(08):27-31
A类：
kopf,Sost,1+Sost
B类：
补肾健脾活血方,防治骨质疏松,骨质疏松症,分子对接技术,细胞实验,实验探究,抑制性,DKK,硬化蛋白,MG63,OP,TCMSP,BATMAN,Uniport,有效成分,GeneCards,CytoNCA,插件,拓扑分析,核心药物,药物成分,Autodock,Tools,含药血清,过过,过表达质粒,质粒转染,染上,酶标法,碱性磷酸酶,ALP,流式细胞仪,钙离子浓度,blotting,Wnt3a,catenin,主要活性成分,中排,结合活性,空载,白血,除过,响成,成骨细胞,分化能力,Dickkopf
AB值：
0.209132
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