典型文献
过表达CD47重组慢病毒的制备及表达
文献摘要：
目的 构建hCD47基因重组慢病毒并观察其在人胶质瘤U87细胞中的表达.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因hCD47,采用双酶切实验鉴定重组慢病毒载体pLVX-hCD47-3flag-ZsGreen-Puro,接着进行慢病毒的包装,将质粒载体导入293T细胞观察转染效率.进一步获取慢病毒转染效率,将慢病毒干预HEK293观察转染效率,最后采用逐孔稀释梯度法检测病毒滴度.采用稳转细胞系的方法将构建好的hCD47重组慢病毒转入胶质瘤U87细胞中,倒置荧光显微镜下观察荧光强度及范围,Western blot检测CD47蛋白表达情况.结果 PCR以及酶切鉴定表明重组慢病毒载体克隆为阳性,病毒包装以及检测转染效率实验结果均显示较高的荧光强度,表明慢病毒被成功构建.病毒滴度检测结果显示为1×108 TU·mL-1.Western blot结果显示,目的基因CD47在稳转hCD47重组慢病毒U87细胞中(hCD47)相比对照组(NC)表达升高.结论 成功构建能够体外有效转染U87细胞的hCD47慢病毒.
文献关键词：
CD47蛋白;重组慢病毒;肿瘤
中图分类号：
作者姓名：
常越;唐翠;徐辉;曹相玫;刘仲涛
作者机构：
宁夏医科大学基础医学院病理学系,银川 750004;宁夏医科大学总医院神经外科,银川 750004
文献出处：
引用格式：
[1]常越;唐翠;徐辉;曹相玫;刘仲涛-.过表达CD47重组慢病毒的制备及表达)[J].宁夏医科大学学报,2022(12):1195-1199
A类：
hCD47,3flag
B类：
过表达,重组慢病毒,基因重组,胶质瘤,U87,聚合酶链式反应,目的基因,双酶,慢病毒载体,pLVX,ZsGreen,Puro,质粒,293T,转染效率,慢病毒转染,HEK293,梯度法,病毒滴度,细胞系,建好,转入,倒置,荧光显微镜,显微镜下,荧光强度,blot,病毒包装,TU,NC
AB值：
0.227782
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