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微小RNA-21靶向抑制c-Ski在转化生长因子-β1介导人冠状动脉内皮细胞上皮间充质转化中的作用
文献摘要:
目的 探讨微小RNA(micro RNA,miR)-21靶向调控核蛋白c-Ski与转化生长因子-β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)介导人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)上皮间充质转化的关系.方法 TGF-β1诱导HCAEC,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测上皮基因标记CD31、间充质基因标记波形蛋白(VIM)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、miR-21及c-Ski表达变化.在HCAEC中过表达c-Ski或抑制miR-21,分析TGFβ1诱导HCAEC表型变化.荧光素报告系统证实miR-21在HCAEC中对c-Ski的调控作用.结果 随着TGF-β1诱导浓度增加,各基因表达呈现剂量依赖性变化.其中,20 ng/mL TGF-β1处理组细胞与未处理组(0 ng/mL)细胞比较,内皮标志物CD31表达下降为(0.150±0.031)倍;细胞间充质标记物波形蛋白表达升高为(7.51±0.78)倍、α-平滑肌肌动蛋白的表达为(15.03±0.78)倍;c-Ski表达下降为(0.20±0.040)倍,miR-21表达增加为(6.47±0.40)倍.过表达c-Ski组或miR-21抑制物组与对照组比较,CD31水平显著增高[分别为对照组的(5.80±0.60)倍和(4.73±0.28)倍],而波形蛋白[分别为(0.420±0.013)倍和(0.300±0.064)倍]、α-平滑肌肌动蛋白[分别为(0.450±0.053)倍和(0.450±0.028)倍]表达水平减低,差异具有统计学意义(P<0.01).与对照组比较,过表达c-Ski或miR-21抑制物与TGF-β1联合处理组的CD31、波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平比较,差异无统计学差异(P>0.05).HCAEC过表达miR-21,c-Ski转录水平较对照组显著较少,差异有统计学意义(P<0.01).此外,miR-21过表达组细胞内c-Ski-3′UTR野生型报告载体的相对荧光强度显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);而c-Ski-3′UTR突变型报告载体的相对荧光强度与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.01).结论 TGF-β1诱导HCAEC发生间充质转化过程中,miR-21逐渐上调,而c-Ski表达下降,且miR-21可靶向抑制c-Ski表达.抑制miR-21或过表达c-Ski可阻止TGF-β1诱导HCAEC发生间充质转化.
文献关键词:
miR-21;c-Ski;TGFβ1;心肌纤维化;上皮间充质转化
中图分类号:
作者姓名:
韩素霞;朱频;盛乐智;杜焕华;陆铮;崔珍玉
作者机构:
上海市浦东新区人民医院心内科,上海201200
文献出处:
引用格式:
[1]韩素霞;朱频;盛乐智;杜焕华;陆铮;崔珍玉-.微小RNA-21靶向抑制c-Ski在转化生长因子-β1介导人冠状动脉内皮细胞上皮间充质转化中的作用)[J].岭南心血管病杂志,2022(04):355-360
A类:
B类:
靶向抑制,Ski,转化生长因子,人冠状动脉内皮细胞,上皮间充质转化,micro,miR,靶向调控,核蛋白,transforming,growthfactor,TGF,human,coronary,artery,endothelial,cells,HCAEC,荧光定量聚合酶链式反应,基因标记,CD31,波形蛋白,VIM,平滑肌肌动蛋白,SMA,表达变化,过表达,荧光素,报告系统,表达呈现,剂量依赖,量依赖性,未处理,降为,标记物,加为,抑制物,减低,联合处理,蛋白表达水平,统计学差异,转录水平,UTR,野生型,相对荧光强度,突变型,转化过程,心肌纤维化
AB值:
0.232482
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