典型文献
高粱高效Ubiquitin启动子的克隆及活性鉴定
文献摘要：
在转基因植物的研究中,启动子是影响转基因表达效率的重要因素之一.植物泛素(ubiquitin)基因启动子以启动效率高、甲基化程度相对较低、遗传性状稳定等特点成为单子叶植物中应用较为广泛的启动子.其中,玉米的Ubi-1是最常使用的Ubiquitin启动子之一.本研究旨在克隆高粱高效Ubiquitin启动子,为高粱及其他单子叶植物的遗传转化研究提供新的组成型启动子选择.本研究从NCBI数据库中查找到多个polyubiquitin基因,下载其起始密码子上游3000 bp的序列.根据Ubiquitin启动子的特点,选择含有5'UTR内含子且大小合适的序列,并通过在线启动子预测网站进行启动子分析,最后选择2个基因(LOC8076096、LOC8063786)进行启动子克隆,将其启动子序列分别命名为U1和U5.将这2个启动子片段PCR扩增后,连入含有GUS报告基因的植物表达载体Ubi-GUS,得到重组表达载体U1-GUS和U5-GUS.重组载体通过农杆菌介导法转化水稻和狗尾草,PCR筛选阳性转化苗,对阳性转化苗进行GUS染色分析,鉴定U1和U5的启动子活性.GUS染色观察发现,所有以U1和U5为启动子的水稻和狗尾草阳性转化苗的根、茎和叶均呈现较深的蓝色,比以玉米Ubi-1为启动子的阳性转化苗的蓝色略深,且以U5为启动子的阳性转化苗比以U1为启动子的蓝色更深,而非转基因的水稻和狗尾草小苗则完全染不上蓝色.因此,启动子U1和U5在水稻和狗尾草中均具有组成型强启动子的活性,可作为新的组成型启动子应用于高粱、水稻、狗尾草及其他单子叶植物的遗传转化研究.
文献关键词：
高粱;泛素基因;启动子;克隆;活性鉴定
中图分类号：
作者姓名：
夏启玉;贺萍萍;张丽丽;张雨良;肖苏生;赵辉
作者机构：
中国热带农业科学院三亚研究院,海南三亚 572024;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业农村部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室/海南省南繁生物安全与分子育种重点实验室,海南海口 571101;中国热带农业科学院海南热带农业资源研究院,海南海口 571101
文献出处：
引用格式：
[1]夏启玉;贺萍萍;张丽丽;张雨良;肖苏生;赵辉-.高粱高效Ubiquitin启动子的克隆及活性鉴定)[J].热带作物学报,2022(12):2443-2452
A类：
polyubiquitin,LOC8076096,LOC8063786,泛素基因
B类：
高粱,Ubiquitin,活性鉴定,转基因植物,转基因表达,表达效率,基因启动子,启动效率,甲基化,遗传性状,单子叶植物,遗传转化,转化研究,NCBI,下载,密码子,bp,UTR,内含子,测网,启动子分析,后选择,启动子克隆,启动子序列,U1,U5,连入,GUS,报告基因,植物表达载体,重组表达,重组载体,农杆菌介导法,水稻,狗尾草,染色分析,启动子活性,观察发现,蓝色,小苗
AB值：
0.255698
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
