目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对脂多糖(LPS)诱导结肠上皮细胞炎症损伤的保护作用.方法 培养结肠上皮细胞Caco-2,并随机分为Control组,LPS组和0.5,1,2 mmol·L-1 Gln组.Control组细胞正常培养,其余组细胞用10μg·mL-1 LPS处理24 h后加入0.5,1,2 mmol·L-1 Gln处理.2 mmol·L-1 Gln组再加入西罗莫司(RAPA)处理,为2 mmol·L-1 Gln+RAPA组.用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;以流式细胞术检测谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞凋亡的影响以及激活雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路逆转谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞功能的影响;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测谷氨酰胺对LPS诱导的Caco-2细胞白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-8(IL-8)影响;以蛋白质印迹法检测谷氨酰胺对LPS诱导Caco-2细胞mTOR信号通路的影响.结果 不同浓度的Gln能够促进正常结肠上皮细胞Caco-2的增殖.Control组、LPS组和0.5,1,2 mmol·L-1 Gln组的细胞凋亡率分别为(7.05±1.38)％,(41.10±1.14)％,(30.54±3.91)％,(19.37±4.49)％和(12.53±0.95)％;细胞IL-17表达量分别为(75.05±15.71),(502.33±22.07),(418.69±6.23),(308.57±7.39)和(156.06±14.93)ng·L-1;IL-8表达量分别为(43.21±13.22),(311.97±16.84),(217.13±4.08),(158.30±10.61)和(107.63±20.01)ng·L-1.与Control组相比,LPS组细胞mTOR及p-mTOR信号通路增加(P<0.05),与LPS组相比,0.5、1、2 mmol·L-1 Gln组细胞mTOR信号通路未发生显著性变化,p-mTOR信号通路随着药物浓度的增加而逐渐降低(均P<0.05);与2 mmol·L-1 Gln组相比,2 mmol·L-1 Gln+RAPA组细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著增加(P<0.05),Caco-2细胞中IL-17、IL-8分泌显著增加(P<0.05).结论 基于mTOR信号通路,谷氨酰胺对LPS诱导的结肠上皮细胞炎症损伤具有一定的保护作用.

结肠上皮细胞;谷氨酰胺;雷帕霉素靶蛋白信号通路;炎症损伤

喻伟;李丽

湖北省直属机关医院 肛肠科,湖北 武汉430071;武汉市第八医院 内一科,湖北 武汉430010

中国临床药理学杂志

[1]喻伟;李丽-.谷氨酰胺对脂多糖诱导结肠上皮细胞炎症损伤的保护作用)[J].中国临床药理学杂志,2022(10):1074-1077,1082

Gln+RAPA

谷氨酰胺,脂多糖,结肠上皮细胞,细胞炎症,炎症损伤,LPS,Caco,Control,西罗莫司,噻唑蓝,MTT,细胞存活率,流式细胞术,mTOR,细胞功能,酶联免疫吸附,蛋白质印迹法,细胞凋亡率,显著性变化,药物浓度,雷帕霉素靶蛋白信号通路

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