典型文献
茉莉花香气相关基因JsTPS启动子的克隆与活性分析
文献摘要:
以茉莉(Jasminum sambac)的花苞为材料,采用染色体步移技术,分离出JsTPS基因的5'端调控序列,对该启动子序列进行顺式作用元件预测.根据茉莉花TPS基因启动子的顺式作用元件分布,扩增出5个不同片段长度的启动子,分别命名为JsTPS-1(494 bp)、JsTPS-2(689 bp)、JsTPS-3(1016 bp)、JsTPS-4(1466 bp)和JsTPS-5(2040 bp),应用GATEWAY技术,构建5个不同长度融合GUS基因的植物表达载体,用农杆菌GV3101侵染烟草叶片,对转化后的烟草叶片进行GUS染色.检测不同片段长度启动子活性,找出该启动子的关键活性区域,对其功能进行初步分析,序列分析结果表明:克隆得到的JsTPS启动子序列长度为2040 bp,该序列包含TATA-box、G-box、CAAT-box等启动子核心元件、光响应元件(ACE、ATCT-motif、Box 4、3-AF1 binding site、G-Box、Sp1和GT1-motif)和激素响应元件[茉莉酸甲酯响应元件(TGACG-motif、CGTCA-motif)、ABRE脱落酸响应元件、生长素响应元件(TGA-box、TGA-element)、水杨酸响应元件(TCA-element)、赤霉素响应元件(GARE-motif)]等,说明该基因的表达可能受到光照、激素(ABA、生长素、茉莉酸、茉莉酸甲酯和水杨酸)的诱导.GUS染色结果表明:其JsTPS-1启动子几乎不染色,JsTPS-2染色相对较弱,而JsTPS-3的染色程度高于JsTPS-4、JsTPS-5,且是5个不同缺失片段中染色最深的片段;GUS酶活性检测结果显示,不同缺失片段长度酶活性与染色结果一致,JsTPS-1的GUS酶活性最低,随着启动子片段加长,GUS酶活性增强,在片段长度为JsTPS-3时酶活性最强,在JsTPS-4、JsTPS-5片段长度,GUS酶活下降.JsTPS启动子至少包括-788~0 bp这段区域才能驱动JsTPS起始转录,相比较其他片段,发现在-1016~0 bp区域时启动子的活性表现最强.推测可能在-1016~-689 bp中含有水杨酸响应(TCA-element)、光响应(3-AF1 binding site)等元件增强启动子的活性,而在-1466~-1016 bp中含有赤霉素负调控响应元件减弱JsTPS启动子的活性.本研究为进一步开展调控茉莉花香气释放研究提供理论基础.
文献关键词:
茉莉花;萜类合成酶;启动子;顺式作用元件;启动子活性
中图分类号:
作者姓名:
林俊杰;李小婷;陈雪津;崔萌;吉玉婷;叶乃兴;陈桂信
作者机构:
福建农林大学园艺学院,福建福州 350002
文献出处:
引用格式:
[1]林俊杰;李小婷;陈雪津;崔萌;吉玉婷;叶乃兴;陈桂信-.茉莉花香气相关基因JsTPS启动子的克隆与活性分析)[J].热带作物学报,2022(01):43-50
A类:
JsTPS,sambac,GATEWAY
B类:
茉莉花,花香,香气,活性分析,Jasminum,花苞,染色体步移技术,调控序列,启动子序列,顺式作用元件,基因启动子,段长度,bp,同长,GUS,植物表达载体,农杆菌,GV3101,侵染,烟草,草叶,启动子活性,活性区域,初步分析,序列分析,TATA,box,CAAT,子核,光响应,响应元,ACE,ATCT,motif,Box,AF1,binding,site,Sp1,GT1,激素响应,茉莉酸甲酯,TGACG,CGTCA,ABRE,脱落酸,生长素,element,水杨酸,赤霉素,GARE,ABA,染色结果,色相,最深,活性检测,加长,这段,负调控,萜类合成酶
AB值:
0.256624
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