为探究弓形虫RH株速殖子体外感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响,构建了弓形虫与小鼠睾丸间质细胞共培养试验模型.将纯化后的弓形虫虫体与细胞按照0:1、1:5、1:1、5:1、10:1、20:1的比例共培养6 h,筛选最佳的弓形虫和细胞共培养比例.在弓形虫与细胞比例为20:1条件下,共培养3h、6h、9h和12h,筛选最佳共培养时间.同时,使用瑞氏-吉姆萨染色液对细胞进行染色,观察共培养情况下细胞状态.培养结束,ELISA检测细胞上清的睾酮浓度,Western blot检测细胞内睾酮分泌相关蛋白StAR、CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的表达水平.结果表明,弓形虫与细胞共培养6 h,当弓形虫与细胞比例高于5:1时,睾酮分泌量显著增加(P<0.05).弓形虫与细胞比例为20:1时,睾酮分泌量随培养时间的延长而增加,且感染组明显高于对照组(P<0.05).染色结果发现,弓形虫1 h内即可进入MLTC-1细胞,12 h细胞内出现大量空泡,60 h左右细胞大量破裂.Western blot结果显示,共培养12 h时,感染组CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的蛋白表达量较对照组显著降低(P<0.05).说明弓形虫可在短时间内进入MLTC-1细胞并通过影响类固醇激素合成酶的表达来刺激睾酮的分泌,但随着时间的延长,弓形虫会抑制相关酶的表达,抑制细胞的正常功能.

弓形虫;小鼠睾丸间质细胞;睾酮;类固醇激素合成酶;共培养

王海论;黄晓宇;余春辰;殷光文;王登峰;王磊;黄志坚

福建农林大学 动物科学学院(蜂学学院)/福建省动物药物工程实验室,福建福州 350002

动物医学进展

[1]王海论;黄晓宇;余春辰;殷光文;王登峰;王磊;黄志坚-.弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究)[J].动物医学进展,2022(10):50-55

类固醇激素合成酶

弓形虫感染,小鼠睾丸间质细胞,睾酮,RH,外感,细胞共培养,试验模型,虫虫,虫体,3h,6h,9h,12h,培养时间,吉姆,细胞状,上清,blot,StAR,CYP11A1,HSD,CYP17A1,分泌量,染色结果,MLTC,空泡,达来

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