目的:研究Angiomotin(Amot)基因沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响,初步评估Amot在乳腺癌中异常表达的分子机制.方法:运用免疫组化、Western blot及RT-qPCR技术在乳腺癌组织及乳腺癌细胞株中验证Amot的表达,进而运用RNA干扰技术特异性地阻断Amot在乳腺癌高表达细胞株MCF-7中的表达,以期了解Amot沉默后对乳腺癌干细胞特性的影响.结果:114例乳腺癌组织中,97例阳性表达,阳性率达85.09％;92例非癌组织中,阳性表达10例,阳性率为10.87％,两组差异具有显著统计学意义(P<0.001).Amot在乳腺癌组织中高表达,定位在细胞核和胞浆中,主要定位于细胞核;组织芯片癌旁组织中低表达.MCF-7细胞系经Amot沉默后,细胞形态学上发生上皮间质表型转化.Amot基因沉默后,乳腺癌MCF-7干细胞相关分子表型标志CD24/CD44双标阳性率的变化:CON组:CD24(11.1±0.55)％、CD44<(0.1±0.48)％;NC组:CD24(12.4±0.62)％、CD44<(0.08±0.7)％;KD组:CD24<(0.1±0.08)％、CD44(81.0±2.02)％.乳腺癌干细胞相关分子表型标志物CD24表达降低,CD44表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.001).肿瘤球形成率:CON组2.6％,NC组2.8％,KD组9.75％;乳腺癌细胞在Amot沉默后形成"肿瘤球"能力增强,差异具有统计学意义(P<0.01).干细胞特性相关基因C-myc、Sox-2表达增加;上皮蛋白E-cadherin表达减弱,间皮蛋白N-cadherin、Vimentin、a-SMA、Snail表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).同时发现,MCF-7细胞系经Amot沉默后,Hippo-YAP通路中YAP及YAP/TAZ表达降低,YAP上游LATS1表达降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论:Amot基因沉默增强乳腺癌干细胞特性,诱发乳腺癌细胞发生EMT.

乳腺癌;MCF-7细胞;Angiomotin;肿瘤干细胞;EMT;Hippo

吕美玲;刘培军;杨瑾

长安大学医院内科,陕西 西安 710064;西安交通大学第一附属医院肿瘤内科,陕西 西安 710061

现代肿瘤医学

[1]吕美玲;刘培军;杨瑾-.Angiomotin基因沉默增强乳腺癌干细胞特性及其机制探讨)[J].现代肿瘤医学,2022(09):1560-1566

Angiomotin,Amot

基因沉默,乳腺癌干细胞,干细胞特性,机制探讨,异常表达,免疫组化,blot,qPCR,乳腺癌细胞,细胞株,干扰技术,地阻,MCF,阳性表达,非癌组织,细胞核,组织芯片,癌旁组织,低表达,细胞系,细胞形态学,表型转化,分子表型,CD24,CD44,CON,NC,KD,明显增强,myc,Sox,皮蛋,cadherin,Vimentin,SMA,Snail,Hippo,YAP,TAZ,LATS1,发乳,EMT,肿瘤干细胞

0.228135