目的:探索抗HSP90单克隆抗体28C10通过靶向肿瘤干细胞促进顺铂(cisplatin,DDP)对人胃癌细胞PAMC82恶性生物学行为的抑制效果及其可能的作用机制.方法:28C10单独或与DDP联合处理人胃癌细胞PAMC82,采用不同实验方法检测该细胞的无血清成球能力、迁移和侵袭能力与克隆形成能力,CCK-8法检测28C10对PAMC82细胞恶性生物学行为和协同DDP抗癌能力的影响.采用细胞免疫荧光及流式细胞术检测PAMC82细胞中HSP90及eHSP90(extracellular HSP90)的表达、定位、eHSP90+亚群比例,以及28C10处理后对ALDH+、CD44+、eHSP90+细胞亚群的影响.采用WB实验检测28C10作用后PAMC82细胞中HSP90、干性相关蛋白以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的变化.结果:胃癌细胞PAMC82膜表面表达eHSP90,具有2％～3％的eHSP90+细胞亚群,且eHSP90+细胞多为与ALDH+或CD44+共阳性细胞.28C10处理能显著抑制PAMC82细胞的成球、克隆形成、增殖、耐药、迁移及侵袭能力,而且和DDP联用的效果更明显(P＜0.05或P＜0.01).流式细胞术分析发现28C10处理显著抑制PAMC82细胞的eHSP90+、ALDH+和CD44+亚群数量(均P＜0.01).免疫荧光实验发现28C10作用后eHSP90发生内吞,WB实验结果显示eHSP90、CD44、ALDH和干性相关蛋白OCT4、SOX2表达量均降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:抗HSP90单克隆抗体28C10可靶向胃癌PAMC82细胞的ALDH+、CD44+肿瘤干细胞相关亚群、内化eHSP90且降低细胞总HSP90的水平、抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而有效地抑制PAMC82细胞的干性、耐药和其他恶性生物学行为,协同DDP显著提高抗癌效果.

胃癌;PAMC82细胞;肿瘤干细胞;eHSP90;28C10;靶向治疗;顺铂

孙新;张蕙雯;孙立新;刘军;遇珑;孙力超;冉宇靓

中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院,国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心,分子肿瘤学国家重点实验室,北京100021

中国肿瘤生物治疗杂志

[1]孙新;张蕙雯;孙立新;刘军;遇珑;孙力超;冉宇靓-.抗HSP90抗体通过内化eHSP90抑制人胃癌干细胞并提高顺铂的抗癌效果)[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2022(04):284-293

eHSP90,28C10,PAMC82,eHSP90+,ALDH+

胃癌干细胞,顺铂,抗癌,单克隆抗体,肿瘤干细胞,cisplatin,DDP,胃癌细胞,抑制效果,联合处理,实验方法,无血清,迁移和侵袭,侵袭能力,克隆形成能力,CCK,细胞恶性生物学行为,细胞免疫,免疫荧光,流式细胞术,extracellular,CD44+,细胞亚群,WB,实验检测,干性,PI3K,AKT,mTOR,通路蛋白,阳性细胞,迁移及侵袭,内吞,OCT4,SOX2,高抗,靶向治疗

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