[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯(DON)诱导仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)焦亡的分子机制.[方法]以500 ng·mL-1 DON和1μmol·mL-14-苯基丁酸(4-PBA,内质网应激抑制剂)单一及联合染毒IPEC-J2细胞24 h.采用CCK-8测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞生长状况;透射电镜观察细胞超微结构;Western blot和RT-qPCR测内质网应激通路和细胞焦亡关键分子的基因相对表达水平和蛋白相对表达水平;流式细胞仪测定活性氧(ROS)含量.[结果]与对照组相比,DON组细胞缝隙变宽、细胞密度降低、超微结构被破坏,ROS、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)含量极显著升高(P<0.01),葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网核信号转导蛋白1(IRE1)、转录激活因子6(ATF6)、诱导消皮素D(GSDMD)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)mRNA相对表达水平极显著升高(P<0.01),GRP78、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1蛋白相对表达水平极显著升高(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性极显著下降(P<0.01).与DON组相比,DON和4-PBA联合处理组的细胞数量增多,细胞缝隙变小,细胞器形态正常,ROS、MDA、IL-1β、IL-18含量以及ATF6、Caspase-1的mRNA相对表达水平极显著下降(P<0.01),GSDMD、GRP78和IRE1的mRNA相对表达水平显著下降(P<0.05),GRP78、CHOP、ATF6、IRE1、GSDMD和Caspase-1的蛋白相对表达水平极显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px活性极显著上升(P<0.01).[结论]DON可通过激活内质网应激通路诱导IPEC-J2细胞焦亡.

脱氧雪腐镰刀菌烯醇;猪小肠上皮细胞;内质网应激;细胞焦亡

马立;金鑫;林佳佳;陈佳雯;海思娆;裘知;王正;汪洋;赵杰;李玉;冯士彬;吴金节;王希春

安徽农业大学动物科技学院,安徽 合肥230036

南京农业大学学报

[1]马立;金鑫;林佳佳;陈佳雯;海思娆;裘知;王正;汪洋;赵杰;李玉;冯士彬;吴金节;王希春-.脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导IPEC-J2细胞焦亡的内质网应激通路机制)[J].南京农业大学学报,2022(06):1211-1219

环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白

脱氧雪腐镰刀菌烯醇,IPEC,J2,细胞焦亡,内质网应激通路,DON,仔猪,猪小肠上皮细胞,苯基,基丁,丁酸,PBA,染毒,CCK,细胞存活率,倒置,细胞生长,生长状况,透射电镜,电镜观察,细胞超微结构,blot,qPCR,关键分,相对表达,白相,流式细胞仪,ROS,缝隙,变宽,细胞密度,调节蛋白,GRP78,核信号,信号转导蛋白,IRE1,转录激活因子,ATF6,消皮素,GSDMD,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶,Caspase,EBP,CHOP,谷胱甘肽过氧化物酶,GSH,Px,过氧化氢酶,CAT,联合处理,细胞数量,细胞器,器形

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