目的 结合体内外实验探讨含药肝孵育液法用于中药体外药理学研究的可行性及麻杏石甘汤抗气道上皮损伤的作用机制.方法 SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(dexamethasone,Dex)及麻杏石甘汤组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤干预大鼠哮喘模型,记录引喘潜伏期,病理切片观察气管组织病理形态和气道上皮细胞超微结构变化,原位杂交和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和蛋白表达;SD雄性大鼠离体气管随机分为正常组、模型组、布地奈德福莫特罗组(budesonide and formoterol fumarate powder for inhalation,BF)及麻杏石甘汤含药肝孵育液组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤含药肝孵育液干预大鼠离体气管损伤模型,记录气管张力变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测气管EGFR、血管内皮生长因子(VEGF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量水平,原位杂交和免疫组化分别检测磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)mRNA和蛋白表达;大鼠气道上皮细胞(RTE)随机分为正常组、模型组、地塞米松组及麻杏石甘汤含药肝孵育液组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤含药肝孵育液干预RTE细胞损伤模型,流式细胞术检测RTE细胞损伤率,Western blot检测RTE细胞EGFR、PI3K蛋白表达.结果 整体研究表明,与正常组比较,模型组气管组织EGFR mRNA和蛋白表达显著升高,气管组织结构形态和上皮细胞超微结构受损;与模型组比较,给药组均可延长大鼠引喘潜伏期,修复气管组织结构形态和上皮细胞超微结构损伤,并下调EGFR mRNA和蛋白表达,以A组药效最为显著.离体组织研究表明,与正常组比较,模型组气管EGFR、VEGF、GM-CSF含量水平显著升高,PI3KmRNA和蛋白表达显著升高;与模型组比较,给药组均可舒张气管环张力,降低EGFR、VEGF、GM-CSF含量水平,并下调PI3K mRNA和蛋白的表达,以A组药效最为显著.离体细胞研究表明,与正常组比较,模型组RTE细胞损伤率显著增加,EGFR、PI3K蛋白表达显著升高;与模型组比较,给药组均可降低RTE细胞损伤,下调EGFR、PI3K蛋白表达,以A组药效最为显著.结论 含药肝孵育液法用于体外药理学研究对各药效指标影响的作用趋势与体内药理作用相一致,具备较好的可行性;麻杏石甘汤减轻气道上皮损伤可能是通过调节EGFR/PI3K信号通路和抑制气道重塑发挥作用.

麻杏石甘汤;含药肝孵育液;支气管哮喘;气道上皮损伤;表皮生长因子受体/磷酸肌醇-3-激酶信号通路;气道重塑

李文宏;樊学程;雷婷;马嘉鑫;谢金根;陈林林;肖雄;高文军

江西中医药大学药学院,南昌330004

中国药学杂志

[1]李文宏;樊学程;雷婷;马嘉鑫;谢金根;陈林林;肖雄;高文军-.基于含药肝孵育液法的麻杏石甘汤抗气道上皮损伤的作用机制研究)[J].中国药学杂志,2022(23):2013-2023

含药肝孵育液,含药肝孵育液法,气道上皮损伤,体外药理学,PI3KmRNA

麻杏石甘汤,结合体,体内外,药理学研究,雄性大鼠,地塞米松,dexamethasone,Dex,比方,大鼠哮喘模型,潜伏期,病理切片,病理形态,气道上皮细胞,细胞超微结构,超微结构变化,原位杂交,蛋白免疫印迹法,blot,表皮生长因子受体,EGFR,离体,体气,布地奈德福莫特罗,budesonide,formoterol,fumarate,powder,inhalation,BF,管损,损伤模型,气管张力,酶联免疫吸附测定法,血管内皮生长因子,VEGF,巨噬细胞集落刺激因子,GM,CSF,含量水平,免疫组化,磷酸肌醇,RTE,细胞损伤,流式细胞术,结构形态,药组,可延长,长大,结构损伤,药效,环张力,体细胞,药理作用,相一致,轻气,气道重塑,支气管哮喘

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