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一种快速提取组织外泌体的分离富集方法
文献摘要：
本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法.通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化.组织解离方法比较试验中,采用组织消化酶解离组织得到的蛋白质含量更高,获得的外泌体组织来源的蛋白质污染小.富集小鼠心组织、小鼠肝组织、小鼠肾组织、人结肠癌组织、人乳腺癌组织和动脉粥样硬化组织的外泌体,并对其进行纳米粒径追踪和透射电镜观察.结果显示,外泌体的粒径均在30～150 nm内,结构清晰明确.对小鼠肝组织富集的外泌体进行蛋白质印迹分析.结果显示,阳性蛋白质标志物CD9、ALIX和CD63的表达,TSG101弱表达,阴性蛋白质标志物Calnexin无表达.本方法集合多种分离措施,能够达到分离纯化外泌体的作用,同时简化了分离组织外泌体的步骤,相对于其他方法,全程只需要4～5 h,节省了富集时间,所富集的外泌体纯度高、可溶性杂蛋白质污染小,实用性更加广泛.使用微量组织样本富集的外泌体即可满足后续纳米粒径追踪、蛋白质印迹、透射电镜和转录物组等分析.
文献关键词：
组织;外泌体;分离;富集
中图分类号：
作者姓名：
王建立;张子怡;秦伟伟;王程程;杨瑞
作者机构：
农业应用新技术北京市重点实验室,北京农学院植物科学技术学院,北京102206;北京恩泽康泰生物科技有限公司,北京102206
文献出处：
引用格式：
[1]王建立;张子怡;秦伟伟;王程程;杨瑞-.一种快速提取组织外泌体的分离富集方法)[J].中国生物化学与分子生物学报,2022(03):365-371
A类：
B类：
快速提取,外泌体,分离富集,富集方法,机械法,切碎,消化酶,解离,组织细胞,细胞悬液,差速离心,超滤,富集纯化,方法比较,比较试验,酶解,蛋白质含量,蛋白质污染,肝组织,肾组织,人结肠癌,结肠癌组织,人乳,动脉粥样硬化,纳米粒,透射电镜,电镜观察,清晰明确,蛋白质印迹,CD9,ALIX,CD63,TSG101,弱表达,Calnexin,分离纯化,化外,其他方法,转录物组
AB值：
0.376919
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