目的 探究不同照射强度的低能量激光(low-level laser therapy,LLLT)对衰老牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖和成骨分化功能的影响.方法 将PDLSCs分为yPDLSCs组(年轻组,15～25岁,男3例,女3例,共10颗牙)和aPDLSCs组(老年组,40～55岁,男3例,女3例,共8颗牙).待上述两组PDLSCs长至80％左右融合率时将细胞分为5组:yPDLSCs组(年轻组)、aPDLSCs对照组(老年对照组)、aPDLSCs 4 J/cm2组、aPDLSCs 8 J/cm2组和aPDLSCs 16 J/cm2组,yPDLSCs组和aPDLSCs对照组不予以激光照射,其余3个实验组分别以4,8,16 J/cm2 LLLT处理aPDLSCs细胞,隔天照射1次,每次照射20 s,共照射3次.克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力.茜素红染色检测各组细胞成骨结节形成量,碱性磷酸酶(ALP)活性检测细胞ALP活性.RT-PCR法检测细胞矮小相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)表达水平.ELISA法检测细胞TNF-α分泌量.结果 与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm2组和8 J/cm2组aPDLSCs的克隆形成率明显升高(P<0.05),16 J/cm2组细胞的克隆形成率变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组克隆形成率明显下降(P<0.01).与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm2组和8 J/cm2组aPDLSCs的成骨结节形成明显增多(P<0.05),16 J/cm2组aPDLSCs的成骨结节形成减少(P<0.05);与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组的成骨结节形成量减少(P<0.01).与aPDLSCs对照组比较,8 J/cm2组aPDLSCs中ALP活性明显升高(P<0.01),16 J/cm2组aPDLSCs中ALP活性降低(P<0.01);与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组ALP活性降低(P<0.01).与aPDLSCs对照组比较,8 J/cm2组aPDLSCs的成骨相关基因Runx2、ALP、OCN表达水平明显升高(P<0.01),16 J/cm2组aPDLSCs中Runx2、ALP、OCN表达水平变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组的成骨相关基因表达水平下降(P<0.01).与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm2组和8 J/cm2组aPDLSCs中TNF-α的分泌明显减少(P<0.05),16 J/cm2组aPDLSCs中TNF-α的分泌量变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组TNF-α的分泌量明显升高(P<0.01).结论 适宜强度LLLT可提高衰老PDLSCs的增殖能力和成骨分化能力.

牙周膜干细胞;低能量激光治疗;衰老;细胞增殖;成骨分化

邵馨;王爽;郭小梅;夜文敏;孔荣荣;宋扬;吴凡;王丽颖

西安交通大学口腔医院,陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室,西安 710004;西安交通大学口腔医院正畸科;西安交通大学口腔医院病理科;空军第九八六医院口腔科;空军第九八六医院心脏外科

山西医科大学学报

[1]邵馨;王爽;郭小梅;夜文敏;孔荣荣;宋扬;吴凡;王丽颖-.低能量激光对衰老牙周膜干细胞增殖和成骨分化功能的影响)[J].山西医科大学学报,2022(11):1452-1457

yPDLSCs,aPDLSCs

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