背景 牙龈间充质干细胞(gingival?mesenchymal?stem?cells,GMSCs)来源外泌体具有与GMSCs相似的生物学功能,在组织工程领域具有良好的应用前景,但目前缺乏其在骨再生中应用的研究报道.目的 探讨GMSCs来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响.方法 体外培养GMSCs,超速离心法提取GMSCs来源外泌体.共聚焦显微镜下观察MC3T3-E1细胞对外泌体的内化摄取.CCK-8法和划痕实验分别检测不同浓度外泌体作用下MC3T3-E1细胞增殖和迁移变化情况.外泌体作用于MC3T3-E1细胞后,碱性磷酸酶(alkaline?phosphatase,ALP)染色检测ALP活性,茜素红染色及定量实验检测钙结节形成状况;RT-qPCR法检测成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平.结果 提取的GMSCs来源外泌体呈现类圆形膜状结构,大小在100?nm左右,表达CD63和Tsg101.外泌体能被MC3T3-E1摄取.GMSCs来源外泌体能够促进MC3T3-E1细胞的增殖和迁移(P<0.05),且呈剂量依赖性;外泌体作用下,MC3T3-E1细胞ALP活性增加(P<0.05),钙结节形成增多(P<0.05),成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平明显上调(P<0.05).结论 GMSCs来源外泌体具有增强MC3T3-E1增殖及成骨分化的作用,这为GMSCs来源外泌体应用于骨再生治疗奠定基础.

牙龈间充质干细胞;外泌体;细胞增殖;成骨分化;成骨样细胞MC3T3-E1

王思拓;时权;杨烁;刘紫微;邹蓉芳;徐娟

解放军医学院,北京 100853;解放军总医院第一医学中心 口腔科,北京 100853;解放军总医院 骨科研究所,北京 100853

解放军医学院学报

[1]王思拓;时权;杨烁;刘紫微;邹蓉芳;徐娟-.牙龈间充质干细胞来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响)[J].解放军医学院学报,2022(04):442-448

牙龈间充质干细胞,间充质干细胞来源外泌体,骨样,MC3T3,E1,体外增殖,成骨分化,gingival,mesenchymal,stem,cells,GMSCs,生物学功能,组织工程,工程领域,骨再生,体外培养,超速离心法,共聚焦显微镜,显微镜下,摄取,CCK,划痕实验,度外,细胞增殖和迁移,碱性磷酸酶,alkaline,phosphatase,ALP,茜素红,定量实验,实验检测,qPCR,成骨相关基因,COL1A1,RUNX2,膜状,CD63,Tsg101,细胞的增殖,剂量依赖,量依赖性,再生治疗

0.265856