试验旨在研究小檗碱(BBR)对沙门菌脂多糖(LPS)诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症的调控作用.首先采用CCK-8法测定LPS和BBR处理IPEC-J2的最佳处理浓度、最佳处理时间以及给药顺序,后将IPEC-J2分为对照组、BBR组(80μmol/L)、LPS组(5μg/mL)和BL组(5μg/mLLPS+80μmol/LBBR);采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测4个组中IL-1β﹑ IL-6及紧密连结蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达量;采用免疫荧光技术检测4个组中Occludin、ZO-1蛋白分布定位情况及其荧光强度;采用Western blot法检测各组中Occludin、Z0-1表达水平.研究结果显示:与对照组相比,LPS组的炎性细胞因子IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著上升(P＜0.05);与BBR组和LPS组相比,BL组的IL-6和IL-1β的mRNA表达水平显著下调(P＜0.05),而ZO-1和Occludin的mRNA表达水显著上升(P＜0.05);免疫荧光结果与Western blot结果均显示,与LPS组相比,BL组的Occludin和ZO-1的蛋白表达量均显著上升(P＜0.05).研究结果表明BBR可抑制LPS诱导IPEC-J2的炎症反应,保护肠上皮细胞的屏障功能.

小檗碱;沙门菌脂多糖;IPEC-J2;Western blot;实时荧光定量PCR

杨彤;杨莉;张旭梅;徐丞惠;温馨;赵顺婷;史慧君;付强

新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐 830052;新疆草食动物新药研究与创制重点实验室,新疆乌鲁木齐 830052;新疆农业大学畜牧学博士后流动站,新疆乌鲁木齐 830052

畜牧与兽医

[1]杨彤;杨莉;张旭梅;徐丞惠;温馨;赵顺婷;史慧君;付强-.小檗碱对沙门菌LPS诱导的猪肠道上皮细胞屏障损伤的改善作用)[J].畜牧与兽医,2022(12):64-71

沙门菌脂多糖,mLLPS+80,LBBR

小檗碱,猪肠道上皮细胞,细胞屏障损伤,猪肠上皮细胞,IPEC,J2,CCK,处理时间,BL,qPCR,连结,结蛋白,ZO,Occludin,免疫荧光技术,荧光强度,blot,Z0,炎性细胞因子,可抑制,屏障功能

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