目的:观察不同活性氧(reactive oxygen species,ROS)及氧化应激水平对脓毒症肾小管上皮细胞增殖、凋亡、周期等生物学效应的影响,探索氧化应激水平和线粒体-Caspase途径能否作为脓毒症肾小管上皮损伤的治疗靶点.方法:用终浓度为10 μg/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理人肾小管上皮HK-2细胞12h建立脓毒症细胞模型,将细胞模型随机分为H2O2组(H2O2,300 μmol/L)、Caspase抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15 μmol/L)、Caspase抑制剂+H2O2组(H2O2,300 μmol/L+Ae-DEVD-CHO,15 μmol/L)和阴性对照组(不处理);另以正常培养的HK-2细胞为空白对照组.Western blot检测Cleaved-Caspase 3和Cleaved-多聚ADP核糖多聚酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达,MTF检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞ROS水平、细胞凋亡和细胞周期.结果:阴性对照组细胞ROS水平、凋亡率、凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较空白对照组升高(P均＜0.05),增殖率较空白对照组降低(P＜0.05).H2O2组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较阴性对照组升高(P均＜0.05),而增殖率较阴性对照组降低(P＜0.05).Caspase抑制剂+H2O2组细胞ROS水平、凋亡率、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-PARP水平以及G1期细胞比例均较H2O2组降低(P均＜0.05),但均高于阴性对照组(P均＜0.05));增殖率较H2O2组升高(P＜0.05),但仍低于阴性对照组(P＜0.05).结论:脓毒症细胞模型中存在异常升高的氧化应激反应.ROS能通过线粒体-Caspase凋亡途径抑制脓毒症肾小管上皮细胞增殖,促进细胞凋亡和引起细胞周期G1期阻滞.抑制Caspase对ROS引起的脓毒症肾小管上皮细胞损伤有一定保护作用.

脓毒症;肾损伤;氧化应激;线粒体;凋亡

孙林春;刘建璟;张利

南京医科大学附属儿童医院儿科研究所,江苏南京210008;江苏省中医药研究院,江苏南京210009;南京中医药大学附属中西医结合医院肾内科;检验科,江苏南京210009

南京医科大学学报（自然科学版）

[1]孙林春;刘建璟;张利-.Caspase依赖的氧化应激对脓毒症肾小管上皮细胞损伤的作用及机制)[J].南京医科大学学报（自然科学版）,2022(01):23-29,70

L+Ae

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