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双唾液酸乳糖-N-四糖保护新生肠道屏障预防坏死性小肠结肠炎的研究
文献摘要：
目的:探讨人乳提取物双唾液酸乳糖-N-四糖（disialyllacto-N-tetraose，DSLNT）对坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）肠道屏障的保护作用机制。方法:（1）取2013年2月至2020年12月南通大学附属常州儿童医院病理科保存的新生儿回肠病理组织石蜡块（NEC 12例，肠闭锁9例）切片后行免疫组化染色，比较其肠道紧密连接蛋白——闭锁小带蛋白1（zonula occludens-1，ZO-1）表达情况。（2）取1日龄SD大鼠28只随机分为对照组（8只）、NEC组（10只）和DSLNT+NEC组（10只），NEC组和DSLNT+NEC组以3次/d的频率、连续3 d进行缺氧（95%N
2，10 min）/冷刺激（4 ℃，10 min）诱导新生大鼠NEC模型，DSLNT+NEC组在造模同时于配方奶中添加DSLNT（300 μmol/L）。72 h后处死所有大鼠，取末端回肠组织处理，比较不同组肠组织损伤及ZO-1表达情况。（3）用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）构建人肠上皮细胞株Caco-2炎性细胞模型并给予DSLNT，分为对照组、LPS组、DSLNT+LPS组，以噻唑蓝法检测细胞活力并以免疫荧光法检测ZO-1表达，验证DSLNT对Caco-2细胞生长和紧密连接的影响。
结果:（1）患儿结果：NEC组病变肠段黏膜层绒毛完整度缺失，肠上皮细胞连接处ZO-1表达明显少于肠闭锁组和NEC组非病变肠段。（2）动物实验结果：NEC组大鼠肠组织病变部位肠上皮层松脱甚至坏死和脱失，ZO-1表达低于对照组和DSLNT+NEC组（
P<0.05）。DSLNT+NEC组大鼠存活率高于NEC组（8/10比6/10），回肠炎症损伤病理评分低于NEC组［2.0（1.0，2.8）比3.5（3.0，4.0）］（
P<0.05）。（3）细胞实验结果：LPS组肠上皮Caco-2细胞出现细胞生长限制和ZO-1免疫荧光暗淡；DSLNT+LPS组Caco-2细胞生长优于LPS组，与对照组相当，同时ZO-1表达强度显著增加。
结论:肠上皮紧密连接损伤是NEC的重要特征之一，ZO-1是NEC药学防治的潜在靶标分子；人乳寡糖单体DSLNT通过调节肠上皮ZO-1表达和紧密连接完整性发挥对新生肠道的保护作用，是天然的肠道屏障调节物质。
文献关键词：
坏死性小肠结肠炎;人乳寡糖;紧密连接;双唾液酸乳糖-N-四糖
中图分类号：
作者姓名：
张雯婷;壮文军;杨明美;丁洁珺;闫竞宇;崔玥;恽琪;顾猛
作者机构：
南通大学附属常州儿童医院儿科实验室，常州 213003;中国科学院大连化学物理研究所分析化学分离科学重点实验室，大连 116023
文献出处：
引用格式：
[1]张雯婷;壮文军;杨明美;丁洁珺;闫竞宇;崔玥;恽琪;顾猛-.双唾液酸乳糖-N-四糖保护新生肠道屏障预防坏死性小肠结肠炎的研究)[J].中华新生儿科杂志（中英文）,2022(04):350-355
A类：
disialyllacto,tetraose,DSLNT,DSLNT+NEC,DSLNT+LPS
B类：
唾液酸,酸乳,乳糖,肠道屏障,坏死性小肠结肠炎,necrotizing,enterocolitis,保护作用机制,南通,常州,儿童医院,病理科,新生儿,回肠,病理组织,石蜡,肠闭锁,后行,免疫组化染色,紧密连接蛋白,zonula,occludens,ZO,日龄,N
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AB值：
0.291722
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