目的:探讨利多卡因在1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型PC12细胞的保护作用,并阐明其可能的分子机制.方法:CCK-8法确定不同浓度(0.2、0.4、0.8、1.6和3.2 mmol·L-1)MPTP的最佳作用浓度和作用时间,CCK-8法确定不同浓度(0.001、0.010、0.100、0.200、0.400、0.600、0.800和1.000 g·L-1)利多卡因最佳作用浓度和作用时间,Western blotting法进一步确定利多卡因最佳作用浓度.将PC12细胞分为对照组(不进行何处理)、MPTP组(给予0.8 mmol·L-1 MPTP作用24 h)、MPTP+利多卡因组(给予0.8 mmol·L-1 MPTP作用24 h后再给予0.6 g·L-1利多卡因作用6 h)、MPTP+利多卡因+DKK1组(给予0.8 mmol·L-1 MPTP作用24 h后再给予0.6 g·L-1利多卡因和100μg·L-1 DKK1作用6 h)和MPTP+DKK1组(给予0.8 mmol·L-1 MPTP作用24 h后再给予100μg·L-1 DKK1作用6 h).流式细胞术检测各组PC12细胞中活性氧(ROS)水平,ELISA法检测各组PC12细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中Wnt配体蛋白1(Wnt1)、β连环蛋白(β-catenin)和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中Wnt1、β-catenin、GSK-3β、磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,MPTP组PC12细胞中ROS、IL-1β、IL-6和TNF-α水平及GSK-3βmRNA表达水平以及GSK-3β、p-GSK-3β和caspase 3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Wnt1、β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与MPTP组比较,MPTP+利多卡因组PC12细胞中ROS、IL-1β、IL-6和TNF-α水平及GSK-3βmRNA表达水平以及GSK-3β、p-GSK-3β和caspase 3蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),而Wnt1、β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05).结论:利多卡因可显著降低PC12细胞中ROS的生成及抑制促炎性细胞因子的释放,同时还可显著下调凋亡蛋白caspase 3的表达,从而发挥对MPTP诱导的PD模型PC12细胞的保护作用,其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关.

帕金森病;利多卡因;氧化应激;Wnt配体蛋白1;PC12细胞

黄笑尘;李浩;王保华;李凯

长春中医药大学附属医院麻醉科,吉林 长春130117;吉林大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室,吉林 长春130021;吉林大学中日联谊医院麻醉科,吉林 长春130033

吉林大学学报（医学版）

[1]黄笑尘;李浩;王保华;李凯-.利多卡因对帕金森模型PC12细胞的保护作用及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(03):638-647

MPTP+,+DKK1,MPTP+DKK1

利多卡因,PC12,苯基,吡啶,帕金森病,CCK,最佳作用浓度,作用时间,blotting,流式细胞术,ROS,上清,qPCR,Wnt1,连环蛋白,catenin,糖原合成,合成酶,GSK,磷酸化,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,caspase,蛋白表达水平,促炎性细胞因子,凋亡蛋白

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