目的 探究MicroRNA-124(miR-124)对脑缺血损伤小鼠神经功能的改善作用及其内在机制.方法 ①取32只C57小鼠随机分为假手术组和脑缺血组(n=16),TTC染色和神经行为学评分检测小鼠脑损伤后3天脑梗死面积和运动情况,RT-qPCR检测miR-124在两组间的表达变化.②培养原代神经元细胞,通过氧糖剥夺模拟缺血再灌注损伤,观察氧糖剥夺后0、72 h miR-124的变化趋势.③另取32只C57小鼠随机分为脑缺血组和脑缺血+miR-124组(n=16),TTC染色、转棒实验和肢体放置实验检测小鼠的运动功能改善情况.④细胞实验分为氧糖剥夺组和氧糖剥夺+miR-124组,通过免疫荧光实验检测两组神经元轴突的生长情况.Targetscan数据库预测miR-124下游靶基因,双荧光素酶基因报告和Western blot在原代神经元等上验证对照组和miR-124组下游靶基因第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(the phosphate and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的表达变化.上调PTEN,检测氧糖剥夺+miR-124和氧糖剥夺+miR-124+PTEN两组神经元轴突的生长情况.⑤在体实验中检测脑缺血+miR-124组和脑缺血+miR-124+Pten组(n=8)转棒实验和肢体放置情况.结果 脑缺血再灌注后,小鼠脑梗死面积约达到40％(P＜0.001),小鼠的神经认知功能显著降低(P＜0.001),已达到重度认知功能损害;miR-124的表达较对照组明显升高(P＜0.05);而进一步过表达miR-124 能够促进氧糖剥夺后神经元轴突的生长(P＜O.05),显著缩小脑梗死面积(P＜0.05),且促进动物运动能力的恢复和改善(P＜0.05);Targetscan数据库预测miR-124下游靶基因为PTEN,双荧光素酶基因报告和Western blot都证实miR-124能有效下调PTEN的表达(P＜0.05);最后,上调PTEN逆转了miR-124促进神经元轴突的生长以及改善小鼠运动能力的效应(P＜0.05).结论 miR-124通过下调PTEN促进脑缺血小鼠神经元轴突生长,且有助于小鼠运动功能的恢复.

miR-124;PTEN;脑缺血损伤;神经元轴突;运动功能

571199海南,海南医学院公共卫生学院;710032西安,空军军医大学西京医院神经外科

[1]张敬炟;戴舒惠-.MicroRNA-124通过调控PTEN促进脑缺血损伤小鼠神经轴突生长和运动功能恢复)[J].陆军军医大学学报,2022(14):1478-1485

124+PTEN,124+Pten

MicroRNA,脑缺血损伤,经轴,轴突生长,运动功能恢复,神经功能,内在机制,C57,假手,TTC,神经行为学,行为学评分,分检,脑损伤后,脑梗死面积,运动情况,qPCR,表达变化,原代神经元,神经元细胞,氧糖剥夺,缺血再灌注损伤,+miR,转棒实验,实验检测,功能改善,细胞实验,免疫荧光,神经元轴突,生长情况,Targetscan,靶基因,双荧光素酶,酶基因,blot,染色体缺失,张力蛋白同源基因,phosphate,tensin,homolog,deleted,on,chromosome,脑缺血再灌注,神经认知功能,认知功能损害,过表达,小脑梗死,进动,运动能力

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